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- 2018-06-02 发布于天津
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检验科通知
荧光定量PCR检测志贺菌方法的建立
高春燕 高庆双 刘树平 许林骥 王晶晶 郑建霞
(河北省唐山市妇幼保健院 检验科 063000 河北 唐山)
注:高春燕为本刊通讯员
摘要:目的 建立一种检测志贺菌属快速敏感的荧光定量PCR方法。方法 根据志贺菌属侵袭性质粒抗原H ( invasive p lasmid, ipaH)编码基因序列,设计1对PCR引物特异性靶基因片段,通过检测3株志贺菌属菌株和9株非志贺菌属菌株来评价该方法的特异性;对福氏志贺菌菌液做一系列10倍稀释后进行荧光定量PCR分析敏感性,PCR扩增产物经电泳和测序鉴定。结果 3株志贺菌属菌株出现特定大小的目的条带,9株非志贺菌属菌株未出现目的条带;测序也证实了PCR产物的特异性;荧光定量PCR检测福氏志贺菌ipaH基因的下限为200拷贝/ ml。结论 本研究建立的方法快速、特异、敏感。
关键词 荧光定量PCR;志贺菌属;ipaH
Establishment and application of fluorescence quantitative PCR for detection of Shigella
Gao Chun-yan, Gao qing-shuang, Liu Shu-ping,XU Lin-ji,Wang Jing-jing ZhengJian-xia
(Tangshan Municipal Materna
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