形成酶标抗体抗原-雅安职业技术学院.pptVIP

DH2十H2O2—D十2H20 非特异IgM由于其在第一步温育中，可与特异IgM竞争与固相抗体结合，所以会影响测定的灵敏度。因此，使用本法测IgM，必须对临床样本进行适当稀释。 （4）加底物显色，加酸终止反应后读取A值。 （5）选择强阳性参考血清的A值为0.8左右，阴性参考血清的A值小于0.1的包被抗原的稀释度作为工作浓度。 （3）将酶标抗体用稀释液稀释成三个浓度，例如1:1000、1:5000和1:25000。温育，洗涤。 （4）加底物显色，加酸终止反应后，读取A值。 （5）以强阳性抗原的A值在0.8左右、阴性参考的A值小于0.1的条件作最适条件，据此选择包被抗体和酶标抗体的工作浓度。 3．非肽类激素测定 如T3、T4、雌激素、绒毛膜促性腺激素、黄体素、胰岛素、皮质醇、促甲状腺素等。 4．药物和毒品测定 如地高辛、苯巴比妥、庆大霉素、吗啡等。 1．加样 应力求准确，并注意不可溅出和产生气泡。 2．温育 注意反应的温度和时间应按规定的要求，整块反应板的温度应一致，以防止“边缘效应” 。 3．洗涤 手工洗板是在每次温育后，将反应液吸出或甩干，然后用缓冲液洗涤2或3次，拍干。使用洗板机洗涤次数要适当增加。 因此，不需对反应液中结合和游离的酶标抗原进行分离，直接测定反应系统中总酶活性的