仪器分析第08篇 章 吸光光度法.pptVIP

吸光光度法;一. 概述;适用于分析半微量和微量的物质;二 . 吸光光度法的基本原理;黄; 4. Beer - Lambert定律——光吸收定律; 吸收光 ， A ， 物质浓度 ;（4）亦可用透射光强度(透射率T%)表示;（5） 吸光系数的二种表示形式;（1）吸收物质在一定波长和溶剂下的特征常数 （2）不随浓度c和光程长度b的改变而改变 （3）同一吸收物质在不同波长下的κ值是不同的 （4）κmax越大表明该物质的吸光能力越强，用光度法测定该物质的灵敏度越高。;5. 偏离Beer-Lanbert定律的原因;按光吸收定律:;讨论 :;减少单色光不纯引起偏差方法 ——— 在?max处测量;b. 溶液本身引起的偏差;例 :;基本组成：;1、光源;2、单色器;3、 吸收池;4. 检测系统（光电池、光电管与光电倍增管、光电二极管等）;光电管;入射狭缝：光源的光由此进入单色器;双光束分光光度计光路图; 四、显色反应和显色条件的选择;1. 显色剂的作用;2.显色反应的要求;3.影响显色反应的因素;例：;(5) 共存离子的干扰 ;显色剂的种类 :;1. 入射光波长的选择;1. 入射光波长的选择 ;2. 参比溶液的选择;3. 读数范围的选择;结论 ：;ΔT=1％;1. 单组分含量测定;1、单组分含量的测定;2、 多组分含量的测定;II. a组分的λ1处，b组分无干扰，但 b组分的测 量λ2处，a组分有吸收; 邻菲罗啉分光光度法测定铁 2mL NH4Fe(SO4)2标准溶液(1mL含10μg Fe)，然后加入1 mL10％盐酸羟胺，摇匀；再加入5mL1 mo1·L-1NaAc溶液，2 mL 0.15％邻二氮菲；最后用蒸馏水定容，摇匀。在510nm波长下，用1 mL比色皿，以试剂空白作参比溶液测其吸光度。; 血清铜的测定 血清1.5ml，加入2mol/L HCl，10min后，加入20%三氯乙酸，离心，上清液加入饱和焦磷酸钠、柠檬酸钠0.2ml，加入20%氨水，再加入0.1%二乙胺基二硫代甲酸钠0.2ml，生成黄色络合物，在420nm下测定。;作业： p. 271-273 . 习题1、2、4、7、13