精液稀释保存.ppt

主要内容 温度的控制 精液的检查 精液的稀释 静置20分钟 精液稀释处理的操作流程图 称重 测密度 合格对倍稀释 计算稀释头份 完全稀释 等待3—5分钟 保存 分装 标记品种耳号 运输 等待3—5分钟 检查原精活力 检查畸形率 检查对倍稀释活力 检查稀释后活力 检查稀释后活力 检查保存后活力 温度控制 空气温度的控制： —夏季空调温度25度！35度？１７度？ —冬季空调温度28度 设备温度的控制：38度！ —温度计、玻璃棒：放到38度恒温箱预热半小时 —调整恒温载物台38度，预热盖玻片、载玻片 —稀释杯：套上稀释袋，放到38度恒温箱中预热 —精液瓶：冬季放到38度恒温箱预热。 稀释液温度：放到38度恒温水槽中 恒温载物台 37-38度 载玻片盖玻片 37-38度 采精杯和输精瓶温度控制 37-38度 精液的检测 观察有无异常：颜色、味道… 精液量：毫升 精子密度：密度仪 精子活力：显微镜 精子畸形率：显微镜 计算精液量 原精称重：要求以电子天平称量精液，按1g=1ml计算。 按照水的密度估测 精液重量 置零或去皮 提起精液 检测密度 矫正仪器 准确测定 读数 矫正密度仪 用红色专用矫正片矫正密度仪 显示数据：误差不能超过基本数字+5 如果超过+5，重新矫正密度仪 一般一个月矫正一次即可。 1、认识矫正密度片 3、读取数据，不能超过基本数据+5 2、插入黑色槽中5秒中 矫正密度片 把干净的、未滴精液度片插入黑槽中。 读数： 60可用，否则废弃。 每次测密度前，矫正密度片是否合格。 测定密度 缓慢把精液搅拌均匀，开始测定。 用玻璃棒滴满精液密度片口，保证不能有气泡。 如果精液过多，用一次性纱布檫掉溢出部分。 密度仪稳定后（显示— — —）时，缓慢推进密度片。 等候5秒钟，显示数据后，X106即是此头猪的密度。 如果密度100，废弃！ 取密度片 用温度计从下往上滴原精 轻轻放入卡槽中 精液密度读数值×106 检查原精液活力 载玻片、盖玻片的温度保持在38度 滴一滴精液在载玻片中，45度角轻轻盖上盖玻片。 坚决不允许有气泡。 用100倍镜头观察视野中直线运动的数目占总精子数的比例，70%丢弃，70%对倍稀释。 精液稀释——对倍稀释： 1、温度计矫正：选取两根读数（38 度）的温度计。 2、同时测量精液的温度和稀释液的温度，两者相差不能超过1度。 3、如果两者相差超过1度，调节稀释液温度使之相等。 4、沿着玻璃棒缓缓倒入相同体积的稀释液与原精中，切勿速度过快，且不可将原精倒入稀释液中，以防精子剧烈运动死亡。 5、沿着一个方向搅拌均匀。 调稀释液温度 温度相等 测原精的温度 测稀释液温度 对倍稀释 再次测定精液活力 检查对倍稀释活率，静止3-5分钟后再次检查活率 检查畸形率 认识什么样精子是畸形？下图 确定全部死亡（原精5分钟后）用400倍显微镜头观察 畸形率15%的废弃。 尾部近端原生质滴 尾部远端原生质滴 发夹形尾巴 疏松顶体 卷曲尾巴 精液稀释——计算精液稀释头份 确定采精量 采精密度 对倍稀释后活力 精子畸形率 头份=采精量*精液密度*稀释活力*（1-畸形率）/30 计算需要添加的稀释液：头份*80ml—对倍稀释的精液量 精液稀释——完全稀释： 1、同对倍稀释 2、添加额定数量的稀释液与精液中。 调稀释液温度 测精液的温度 测稀释液温度 全部稀释 温度相等 小杯倒入大杯 精液稀释的关键点 稀释过程在半个小时完成，否则精子死光光！ 精液不能受到阳光的直射，有害气体的污染，飞尘的污染，强烈震动。 操作台一定要泡沫板上，不能在水泥台直接进行。防止应激死亡。 精液的分装 精液瓶的温度：与精液温度保持一致，冬季要加温！ 每隔4-6分钟轻轻搅拌均匀再分装，防止精液沉淀降低活力。 公猪精液沿着精液壁缓缓流下，以免震动过强，精子死亡。 排尽空气：降低精子氧气消耗，降低精子代谢强度，延长保存时间。 公猪耳号：一定要标清！！——非常重要 不同的品种，使用不同的颜色标记，同一头公猪使用相同的颜色标记。 分装前静置3-5分钟检查活率 整个过程分装4-6份后要轻轻搅拌均匀 输精瓶上标清楚品种 耳号 分装精液时输精瓶要倾斜45度角 排尽空气柠紧瓶盖 精液的短期保存 —3-4小时的保存 3～4小时内的保存不用降温。放在常温（25℃左右室温）让它自然冷却即可！ 为什么精液要平放？ 平放能使精子充分的增加精子的漂浮面积，以防精液沉淀堆积死亡，延长保存时间。 密封好的精液要平躺摆放 用毛巾盖好 运输前静置20分钟检查活率 精液的长期（3天）保存