分子生物学课件MB-6 转录后加工知识讲稿.pptVIP

2018-5-30 1 第六章 转录后加工Chapter 6 Post-transcriptional Processing 2018-5-30 2 多数转录的初始产物无生物活性，在生物体内进行加工处理后才具有生物活性。 转录后加工（post-transcriptional processing）: 是指将各种前体RNA分子加工转变成有功能的、 成熟的各种RNA(mRNA、rRNA或tRNA等) 的过程 2018-5-30 3 加工的三种形式： ① 减少部分片段：如切除5’端前导序列，3’端尾巴和中部的内含子； ② 增加部分片段：5’加帽，3’加ploy(A)和通过编辑加入一些碱基； ③修饰：对某些碱基进行甲基化等 2018-5-30 4 1、原核生物tRNA前体的加工 tRNA基因：约60个 原核生物tRNA初始转录本有三种 （1）多数为串连在一起的多顺反子(polycistron） （2）少数为单顺反子 （3）由tRNA和rRNA串连组成 一、原核生物转录后的加工 2018-5-30 5 原核生物 两种类型的 tRNA基因： Ⅰ型：有3’-CCA-OH，切除附加序列使其显露出该末端结构； Ⅱ型：无3’-CCA-OH，前体切除附加序列后在酶作用下添加此结构 2018-5-30 8 2、原核生物rRNA前体的加工 ◆ 共有7个rRNA转录单位 ◆ rRNA基因和tRNA基因混合组成一个操纵子： 16SrRNA-tRNA-23SrRNA-5SrRNA-tRNA 2018-5-30 9 加工过程： 特定位点进行甲基化，产生甲基化修饰成分 核酸酶：RNaseIII，RNaseE和RNaseR 2018-5-30 10 一般不需要加工，转录后直接进行翻译； 少数多顺反子mRNA须通过核酸内切酶切成较小的单位，然后再进行翻译。 3、原核生物mRNA前体的加工 2018-5-30 11 2018-5-30 12 1、tRNA的转录后加工 二、真核生物RNA前体的加工 真核tRNA的基因与原核不同： 真核的前体分子 tRNA数目多、单顺反子、成簇排列、有基因间隔区； 真核的tRNA前体中含有内含子； （位于反密码子环下游、长度和序列各异、内含子外显子交界处无保守序列、剪接有RNase参与、内含子与反密码子配对） 其加工过程要剪接内含子, 在3’末端加CCA-OH 真核生物tRNA前体及其加工的特点 2018-5-30 13 2018-5-30 14 酵母tRNA前体的体外剪接 tRNA前体电泳 只出现一条带 加入核酸内切酶 出现两条带 2018-5-30 15 剪接： 去除初级产物中5’端和3’端的序列； 剪接内含子序列 加CCA-OH 3’末端 修饰： 甲基化；还原；核苷内的转位；脱氨 加工过程 2018-5-30 16 2018-5-30 17 2018-5-30 18 碱基修饰的方式： 2018-5-30 19 2、rRNA前体的加工 rRNA基因拷贝数较多，成簇排列 28S、18S、5.8S基因组成一个转录单位，5S rRNA分开转录 不同物种间前体rRNA的大小不同 2018-5-30 20 加工过程 2018-5-30 21 3、mRNA前体的加工 pre-mRNA capping tailing splicing methylation editing mature mRNA 2018-5-30 22 （1） mRNA的5加帽 成熟的真核生物并没有游离的5’端，只有所谓的帽子结构，该结构是通过转录加工加上去的。 mRNA的5’加帽是一个多步加工过程，第一步是鸟苷转移酶将一个鸟苷酸加在5’RNA的前端。第二步由鸟嘌呤甲基转移酶将一个甲基基团加到嘌呤环的7位氮原子使5’帽子鸟嘌呤转变为7-甲基鸟嘌呤。 2018-5-30 23 ● After 30 ±Nt transcripted, pre-RNA capping start 5’ pppXpY---------------------(30 Nt)-3’ (pre--RNA) pi ppXpY----- mRNA capping proceeding GTP SAM ppXpYp----------- GpppXpYp---------------- SAH ppi Gp m7 -(with Cap-0) 2018-5-30 24 SAM SAM m7GpppXmpYp--------------- m7GpppXmpYmp--------------- SAM; S 腺苷蛋氨酸 SAH; S – 腺苷高半胱氨酸 S