生物化学DNA复制、转、翻译.ppt

三、蛋白质合成的抑制剂 抗生素：嘌呤霉素（发生在转肽过程） 毒素：白喉毒素是一种蛋白质（抑制肽链的移位） 干扰素 * 嘌呤霉素作用示意图 * THE　END，THANK　YOU！ * * * * (三)tRNA是转运氨基酸的工具 反密码环 氨基酸接受位点 （aa共价结合到A残基上） 反密码子 * 密码子与反密码子配对的方式 * U 摆动配对 U * 密码子、反密码子配对的摆动现象 tRNA反密码子 第1位碱基 I U G A C mRNA密码子 第3位碱基 U, C, A A, G U, C U G * 二、蛋白质的生物合成过程 （一）氨基酸的激活 （二）在核糖体上合成肽链 起始 　　　　　延长 　　　　　终止 （三）肽链折叠和加工 * （一）氨基酸的活化（氨酰-tRNA的合成） 氨基酸 + tRNA 氨酰- tRNA ATP AMP＋PPi 氨酰-tRNA合成酶 氨酰-tRNA合成酶具高度专一性，表现在： 　　 　　　　1）对氨基酸； 2）对tRNA 　从而保证了蛋白质合成的忠实性。 场所？ * tRNA与酶结合模型 tRNA 氨基酰-tRNA合成酶 ATP * 第一步反应 氨基酸 ＋ATP-E —→ 氨基酰-AMP-E ＋ PPi * 第二步反应 氨基酰-AMP-E ＋ tRNA ↓ 氨基酰-tRNA ＋ AMP ＋ E * 氨酰-tRNA的表示方法： 　　Ala-tRNAAla 　Ser-tRNASer　　　Met-tRNAMet 真核生物： Met-tRNAiMet 原核生物： fMet-tRNAifMet(fMet:N-甲酰甲硫氨酸) 起始氨酰- tRNA的表示： 细胞中有两种tRNA可携带甲硫氨酸: （1）起始tRNA，可简写为:tRNAiMet （2）携带甲硫氨酸掺入到蛋白质内部的tRNA, 写作:tRNAMet * （二）在核糖体上合成肽链 起始　 延长　　终止 1、起始： 　　指mRNA和起始氨酰-tRNA分别与核蛋白体结合而形成翻译起始复合物。 A. 核蛋白体大小亚基分离； B. mRNA在小亚基定位结合； C. 起始氨基酰-tRNA的结合； D. 核蛋白体大亚基结合。 * A、 核蛋白体大小亚基分离 以E.coli为例 起始因子（IF3－促使大小亚基分离，IF1－占据A位点 ） IF-3 IF-1 * A U G 5 3 IF-3 IF-1 B、mRNA在小亚基定位结合 以E.coli为例 * IF-3 IF-1 IF-2 GTP C、 起始氨基酰tRNA( fMet-tRNAimet )结合到小亚基 A U G 5 3 以E.coli为例 起始因子（IF2－促使起始rRNA与P小亚基结合） 由 GTP 分解提供能量 * IF-3 IF-1 IF-2 GTP GDP Pi D、 核蛋白体大亚基结合， 　　起始复合物形成 A U G 5 3 以E.coli为例 * IF-3 IF-1 A U G 5 3 IF-2 GTP IF-2 -GTP GDP Pi 以E.coli为例 * * 2、延伸：(核蛋白体循环) 　指根据mRNA密码序列的指导，次序添加氨基酸从N端向C端延伸肽链，直到合成终止的过程。 包括以下三步： 进位 → 成肽 → 转位 * （一）进位 指根据mRNA下一组遗传密码指导，使相应氨酰-tRNA进入核蛋白体A位。 * （二）成肽 由转肽酶催化的肽键形成过程。 无负载 转肽酶（肽酰转移酶 ） * （三）移位 延长因子EF-G有转位酶( translocase )活性，可结合并水解1分子GTP，促进核蛋白体向mRNA的3侧移动 。 移位酶 核糖体沿着mRNA5’→3’方向移动一个密码子的距离。 * fMet A U G 5 3 fMet Tu GTP * 进位 转位 成肽 * 重复进位、转肽、移位三个步骤，每重复一次肽链即增长一个氨基酸。 * 　当mRNA上终止密码子出现后，多肽链合成停止， 肽链从肽酰-tRNA中释出，mRNA、核蛋白体等分离。 3、终止： 终止相关的蛋白因子称为释放因子( RF) 一是识别终止密码，如RF-1特异识别UAA、UAG；而RF-2可识别UAA、UGA。 二是诱导转肽酶变为酯酶活性，使肽链从核蛋白体上释放。 释放因子的功能: 原核生物释放因子：RF-1，RF-2，RF-3 真核生物释放因子：eRF * 原核肽链合成终止过程 * U A G 5 3 RF COO- * 多聚核蛋白体 —使蛋白质合成高速、高效进行。 * 电镜下的多聚核蛋白体现象 * 肽链合成后，经若干加工后，才能使合成的肽链具一定的空间结构和生物学活性。 真核生物的加工部