第十一篇 章 离体培养育种 园林植物育种学课件.pptVIP

第11章 植物离体培养育种 本章提要 组织培养的基本概念及基本原理 花药培养、试管受精、体细胞无性系变异 原生质体培养及体细胞融合、人工种子等 11.1 植物组织培养概述 11.1.1 植物组织培养的概念与内容 植物组织培养：是指在无菌条件下，将离体的植物材料培养于人工培养基上，并给以适当的培养条件，使之形成完整植株或生产出具有一定经济价值的生物产品的一种技术。 包括:植株培养、茎尖培养、胚培养、胚珠和子房培养、花药与花粉培养、离体器官培养、胚乳培养、细胞培养、原生质体培养、离体授粉培养。 外植体：通常用于培养的植物材料称为外植体。 继代培养：由最初的外植体上新增殖的组织，继续转入新的培养基上进行培养的过程称继代培养。 无性系：由同一外植体反复进行继代培养后，所得的一系列无性繁殖后代统称为无性繁殖系，简称无性系。 愈伤组织：在细胞培养中，由外植体形成的一团无特定结构和功能的细胞团称愈伤组织。 11.1.2 植物组织培养在园林植物育种中的应用 利用茎尖等培养进行园林植物的快速繁殖和工厂化育苗 利用微茎尖培养获得无病毒植株 结合细胞和组织培养进行突变体的诱导和筛选 利用花药与花粉培养等进行单倍体育种 利用胚乳培养等获得三倍体植株 利用胚胎培养和体细胞杂交等克服远缘杂交障碍 利用离体培养进行种质资源的长期保存和远距离运输 通过组织培养提供生物技术育种的中间材料 11.2 花药与花粉的离体培养 11.2.1 花药培养 材料的选取及其预处理 用于培养的花药最适宜的时期因物种不同而异。 金 花 茶 11.2.1.2 培养基的筛选 基本培养基的成分、激素种类和浓度、蔗糖的浓度等都会影响到花粉的脱分化和再生及完整植株的形成。 11.2.1.3 调节取材植株的生理状况 植株的生理状况也会影响花粉植株的形成。 11.2.1.4 单倍体植株的鉴定 从离体花药中诱导出植株后，要进行花粉单倍体植株的鉴定。 11.2.2 花粉培养 11.2.2.1 花粉的分离和培养 花粉的分离：自然散落法、挤压法和器械法。 11.2.2.2 预处理 低温预处理 离心处理 乙烯利处理 11.2.3 雄核发育途径 营养细胞发育途径 生殖细胞发育途径 营养细胞和生殖细胞并进发育途径 花粉均等分裂途径 11.2.4 染色体加倍技术 单倍体植物染色体加倍用得最多的是化学诱变法。 11.3 胚和胚乳的离体培养与试管受精 11.3.1 胚培养技术 远缘杂交获得的种子胚发育不良，但具有正常的潜力，若把胚在开始夭折之前剥离出来，置于适当的培养基上培养，则能获得杂种植株。 11.3.2 胚乳培养技术 11.3.2.1 胚乳培养的方法： 取有胚乳的果实或种子，进行表面灭菌。然后在无菌条件下剥离胚乳接种培养。培养分带胚培养和不带胚培养两种方式。 11.3.3 离体受精技术 11.3.3.1 离体受精的概念和意义 离体受精是指在离体条件下，通过裸露的胚珠上授粉而结实的一项技术，又称为试管受精。 意义：可以克服远缘杂交中诸多技术难点。 11.3.3.2 离体受精的方法 从胎座上切下单个胚珠，接种于培养基然后授粉。 带有完整胎座或部分胎座接种并授粉。 带有完整子房或部分子房壁接种并授粉。 柱头接近法，即将花粉撒在本种植物的柱头上，切下柱头接种在培养基上。 哺育法，先把有助于花粉发芽的培养基涂满胚珠表面，然后在胚珠上散播花粉使之受精。 11.4 体细胞无性系变异 由任何形式细胞培养所获得的再生植株称为体细胞无性系，而将再生植株所表现出来的变异称为体细胞无性系变异。 11.4.1体细胞无性系变异的原因 基因型 外植体 外源激素 继代培养时间 11.4.2 利用体细胞无性系变异进行育种 它可以在保持品种原有优良性状不变的情况下改进个别观赏性状； 它与辐射诱变相结合可成为高敏细胞诱变育种方法，提高植物品种改良的效率； 体细胞无性系变异后代遗传稳定快，育种年限短； 可通过在培养基中加入一定的选择压力而筛选到特定的突变体； 因其存在细胞质突变，可选择到新的细胞质雄性不育系。 11.5 原生质体培养与体细胞融合 11.5.1 植物原生质体培养 11.5.1.1 原生质体的分离方法 机械分离法 酶解分离法 11.5.1.2 原生质体的纯化 过滤-离心法 悬浮法 界面法 11.5.1.4 原生质体培养 固体培养法 液体浅层培养法 双层培养法 11.5.2 植物原生质体融合 11.5.2.1 原生质体融合的类型 自发融合 诱导融合 11.5.2.2 诱导原生质体融合的方法及融合剂 盐类融合法 高钙和高pH融合 聚乙二醇融合法 聚乙二醇与高钙和高pH相融合的融合法 * * * * * *