VEGF C-T基因多态性与进展性卒中相关性的研究.docVIP

　　VEGF 936C/T基因多态性与进展性卒中相关性的研究 【摘要】; 目的 探讨VEGF936C/T多态性与进展性卒中的相关性。方法 经临床确诊的脑梗死患者200例，分成普通脑梗死组134例和进展性卒中组66例，另选年龄、性别相匹配的健康对照组100例。应用RFLP方法对所有受检者的VEGF基因型进行鉴定；分析VEGF936C/T基因多态性与进展性卒中的相关性。结果 进展性卒中组936T等位基因的携带频率高于健康对照组，VEGF936T与进展性卒中有相关性（OR：1.882；95%可信区间1.269～2.789）；而普通脑梗死组936T等位基因的携带频率与健康对照组差异无统计学意义。结论 携带936T等位基因可增加患者脑梗死进展的风险性，而936CC可降低脑梗死进展的风险性。 【关键词】; 进展性卒中 VEGF936C/T 单核苷酸多态性 ; Correlative study on 936C/T gene polymorphism of vascular endothelial gro ; ［Abstract］; Objective; To investigate the association betorphism of vascular endothelial groethod of restrictive fragment length polymorphism（RFLP）,the VEGF genotypes of 66 stroke in progression patients,134 completed stroke patients and 100 healthy control subjects orphism and stroke in progression pared.Results; The frequency of VEGF carreiers pleted stroke ilar ; ［Key orphisms ; 进展性卒中（stroke in progression,SIP）是指卒中发病后神经功能缺失症状在48 h内逐渐进展或呈阶梯式加重。其发病率为卒中患者的30%，致残率和致死率较一般卒中高，是影响病人预后的重要原因之一，也是脑血管病治疗中的难点。目前，已经发现的危险因素有高血压病、糖尿病、感染、人疱疹病毒感染和脑血管狭窄等。尽管我们对以上危险因素进行了积极的防治，仍有一部分患者会进展。说明进展性卒中的病因仍没有完全阐明。遗传、多基因、多态性这三个方面是进展性卒中研究的热点。应用单核苷酸多态性进行遗传性相关性研究，可以为脑卒中进展的危险性提供预示作用。 ; 血管内皮生长因子（vascular endothelial gro ; 1; 对象与方法 ; 1.1; 研究对象; 2005年1月～2006年1月期间哈尔滨医科大学附属二院神经内科病房的住院患者200例，男107例，女93例，年龄35～75岁，平均（62±10.3）岁，排除其他肿瘤性疾病。按病变进展情况分为普通脑梗死组134例和进展性卒中组66例。对所有患者标明有无进展性卒中可能的危险因素［3］（糖尿病、高血压病、感染、脑血管狭窄＞50%、高血脂、高尿酸、高纤维蛋白原），同时选取与病例组的性别和年龄相匹配的健康志愿者100例作为对照组。所有研究对象均为东北汉族人。 ; 1.2; 仪器与试剂; 人血基因组DNA提取试剂盒（离心柱型）由TIANGEN-QIAGEN提供；Taq酶、dNTP、10×loading buffer、20bp DNA marker购自Takara公司；NIa限制性内切酶购自NEB；VEGF引物合成由美国ABI公司完成。 ; 1.3; 方法; 用RFLP法鉴定VEGF的基因型。抽取每位受检者空腹静脉血3ml,按照常规方法从白细胞中提取基因组DNA，4 保存。PCR引物参照文献［2］设计并合成，正向引物：5-AAGGAAGA GGAGACTCTGCGC-3’，反向引物：5-TATGTGGGTGGGTGTGTCTA CAG-3’。PCR反应体系50 μl,包括正向反向引物各1 μl、dNTP4 μl、模板DNA 8 μl、Taq酶1 μl、ddH2O 30 μl、lodding buffer 5 μl。PCR反应条件：95 预变性4min、95 变性30s、60 退火45s、72 延伸45s、30个循环后、72 再延伸5min。产物用2%琼脂糖凝胶电泳鉴定，为198bp。PCR产物用限制性内切酶NIa（Ne ; 1.4; 统计学方法; 所有数据应用 ; 2; 结果 ; 用RFLP法鉴定VEGF的基因型，其电泳结果见图1。VEGF 9