植物组织培养教案——常见观赏植物组织培养.docVIP

植物组织培养教案常见观赏植物的组织培养? ?????????? 课程__植物组织培养__????? 200 /200? 学年第_ 一__学期???????????? 教师______ ??? 授课日期 ? ? ? ? ? ? 班??? 级 ? ? ? ? ? ? ? ? 课??? 题：????????????? ?常见观赏植物的组织培养 ? ?教学目标：了解常见观赏园艺植物非洲菊、大花蕙兰、百合、薰衣草、红叶石楠等植物植物组织培养概况、培养程序。 ? 重点难点：非洲菊、大花蕙兰、百合、薰衣草、红叶石楠等观赏植物组织培养技术。 ? 教学方法：课堂讲授 ? ?教??? 具：多媒体教学 ?教学参考书：《植物组织培养》 ? 课后作业：1、 非洲菊在增殖培养阶段易产生过密的丛生芽，如何降低丛生芽密度，以减少生产损失？ 2、大花蕙兰固体培养中常发生褐化现象，如何减轻褐化发生？ 3、 百合离体培养可通过哪些途径再生植株？ 4、 薰衣草离体培养过程中发生玻璃化现象，如何减轻玻璃化现象发生？ 5、 红叶石楠离体培养过程中较难生根，查阅相关研究资料，回答实践中采用了哪些技术措施以提高生根率？ ? ? 教学札记： ? ? ? ? ? ???? ??????????????????????????????????????????????????????????? ?编写日期： ? 教案附页 ? 一、非洲菊的组培培养 （一） 国内外研究概况 非洲菊（Gerbera? jamesonii Bolus ）又名扶郎花，为菊科非洲菊属多年生宿根草本花卉，其花大、色艳、品种繁多，是国际著名五大鲜切花品种之一，在我国的需求量日益增加。非洲菊为异花授粉植物，自交不孕，有性繁殖易产生分离，无性分株繁殖系数低（一般为5—6），难于满足生产需求，且分株繁殖代数越多，品种会逐渐退化。因此，组织培养为非洲菊的主要繁殖方式，可在短期内大量生产优质种苗，亦可用于生产脱毒苗，防止种质退化。 非洲菊离体再生一般有愈伤组织再生途径及器官直接发生两条途径。主要通过愈伤组织再生途径。国外对非洲菊的组织培养研究得较早。Pierik等（1973）首先报道了用花托和花萼诱导出愈伤组织；国内黄济明等（1983）最早以花托为外植体诱导出幼苗。 目前非洲菊组织培养主要以花托、叶片为外植体诱导丛生芽发生，以其他器官为外植体培养的报道较少。以花托作外植体诱导愈伤组织与不定芽形成，具有易表面灭菌、愈伤组织诱导的速度快、分化率高、繁殖系数大等特点。 关于非洲菊组织培养研究国内外有不少报道，对其愈伤诱导、不定芽分化、继代增殖与生根等作了较详细的研究。已建立了非洲菊的组织培养工厂化育苗生产体系，并实现了商品化生产。周仁超(2001)在附加6-BA、NAA、IBA各1mg/L的MS培养基中诱导出叶片的愈伤组织，并在18天后出现了芽的分化，后转入附加BA2.5mg/L、IAAO.8mg/L的MS培养基中增殖，20天后增殖系数达8.8，转接到1/2 MS+NAAO.3mg/L培养基中10天后有根的形成；杨桂芬等(2000)研究认为：有利于生根的增殖培养中分裂素和生长素的浓度都应当相对较低，最适宜组合BAO.1-0.5mg/L 、NAAO.01-0.05 mg/L。非洲菊的生根对生长素浓度适宜范围较宽，认为不添加任何生长素，生根效果也较好。 非洲菊的组织培养一般采用MS为基本培养基，生根时常用1/2MS培养基为基本培养基。光照时间12-14h，光照强度1500-2000Lx，蓝光有利其诱导愈伤组织， 26左右时增殖率高。pH6.2-6.8时产生的愈伤组织结构致密，pH低于5.4或高于8.0时产生的愈伤组织松散。 非洲菊在增殖培养阶段易产生过密的丛生芽，这是非洲菊生产中的一个及待解决的主要问题，在微繁生产中导致超过30%的产品损失。可采用降低细胞分裂素浓度、添加适量GA到增殖培养基中等方法，降低丛生芽密度，以减少生产损失。 （二） 培养程序 1、外植体选择 从生长健壮的非洲菊植株上采取花托、叶片等作外殖体。 外植体的表面灭菌 ? 将幼嫩花托等外植体于取材当日用饱和洗涤液浸泡5—10min，用自来水冲洗20—30min除去表面污物，然后在无菌状态下用70%酒精浸泡30S，无菌水冲洗一次，再用0.1%HgCL2浸泡6—7min，最后用无菌水冲洗3-4次，每次1—2min，滤干水分，以备接种。 2、培养基与培养条件 启动培养基：MS+ 6-BA4.0-5.0mg/L+IBA0.25-0.5mg/L。 分化培养基：MS+6-BA2.0-3.0 mg/L + IBA0.25 mg/L。 增殖培养基：MS+ 6-BA3.0 mg/L + IBA0.25 mg/L + GA0.5 mg/L。 生根培养基：1/2MS附加NAA0.1