一般毒性作用及其试验与评价方法.pptVIP

蓄积毒性试验的目的： 求出外源化学物的蓄积系数，了解蓄积毒性大小 为慢性毒性试验和其它有关毒性试验的剂量选择提供参考依据 为制定有毒物质在食品中的卫生限量标准时，为安全系数的选择提供参考 确定该受试物可否用于食品供人类长期食用 第28页/共43页 三、机体的耐受性 机体对化学物的耐受性：一些化学物在体内蓄积到应该产生中毒反映的剂量时却没有出现中毒反应，必须再加大剂量才能出现预期的中毒反应的现象。 机体对化学物的蓄积和耐受往往是同时存在的！ 农药、兽药残留！ 第29页/共43页 第三节 亚慢性毒性作用 一、基本概念 定义：亚慢性毒性是指实验动物连续多日接触较大剂量的外源化学物所出现的中毒效应。 较大剂量 ---- 没有明确的剂量范围下限 但剂量上限急性LD50。 较长时间 ---- 通常为3～6个月，由试验的目的而定。 第30页/共43页 亚慢性毒性试验目的： 主要是为慢性毒性试验做准备！ 1、确定其观察到有害作用的最低剂量（LOAEL）和未观察到有害作用的剂量（NOAEL），初步提出这种受试物的安全限量参考数值。 2、确定受试物亚慢性毒性的效应谱，毒作用特点和靶器官。 3、研究受试物亚慢性毒性损害的可逆性。 4、为慢性毒性试验的剂量设计及观察指标选择提供依据。 5、为在其它试验中发现的或未发现的毒作用提供新的信息，比较不同动物物种毒效应的差异，为受试物毒作用机制研究和将研究结果外推到人提供依据。 第31页/共43页 二、亚慢性毒性试验设计的要点 （一）试验动物的选择 1、物种品系：啮齿类、非啮齿类 2、性别：雌雄各半 3、年龄/体重：断乳不久的动物 如大鼠80～100g（21-23日龄），小鼠15g左右（18-21日龄） 4、动物数：大小鼠每组≥20只，犬猴每组≥6只； 5、环境要求：应使用SPF及以上等级动物；符合国家实验动物标准的实验环境。 第32页/共43页 （二）染毒方式 一般采用经口、经呼吸道、经皮肤染毒 经口染毒多采用掺入饲料法 两个基本原则： 尽量模拟人类在环境中接触该化学物的途径或方式； 应与预期进行慢性毒性试验的接触途径相一致。 第33页/共43页 （三）剂量分组 至少设四组：3个剂量组和1个阴性对照组 高剂量组 以急性毒性试验的阈剂量或以LD50为参考 应能引起明显的毒性或少量动物死亡（10%） 中剂量组 相当于观察到有害作用的最低剂量（LOAEL） 低剂量组 应无中毒反应，相当于未观察到有害作用剂量（NOAEL），可依据急性毒性的阈剂量或急性LD50的1/20～1/5确定 第34页/共43页 （四）观察指标 1．一般性指标： （1）外观体征、行为活动：每日观察、记录 （2）体重：一般每周称重一次 （3）饲料消耗量：每周记录，计算食物利用率 食物利用率是指动物每食入100g饲料所增长的体重克数。 （4）异常表现、中毒症状 2．实验室检查：血象检查、尿液；肝、肾功能的检测 3．病理解剖学和组织学检查 4．其他指标 第35页/共43页 观察指标 第36页/共43页 三、亚慢性毒性作用的评价 亚慢性毒性无作用剂量（NOAEL）≤人的可能摄入量的100倍，表示毒性很强，放弃该化学物的使用； 在100～300倍之间的，可进行慢性毒性试验 如≥300倍的不必进行慢性毒性试验，可直接进行毒性评价 第37页/共43页 第四节 慢性毒性作用及其试验 一、基本概念 慢性毒性是指实验动物长期小剂量反复接触受试物所引起的毒性效应。 长期：小鼠一般为18个月（寿命1-2年），大鼠为24个月（寿命2-3年），其他动物2年，甚至终身。 第38页/共43页 二、慢性毒性试验设计 （一）实验动物的选择 1、物种品系：啮齿类、非啮齿类 2、性别：雌雄各半 3、年龄/体重：初断乳动物 如大鼠50～70g，小鼠10～15g左右 4、动物数：大小鼠每组40～60只，犬猴每组8～12只 繁殖特性：小鼠成熟早，繁殖力强，寿命1-3年。新生仔鼠周身无毛，通体肉红，两眼不睁，两耳粘贴在皮肤上。一周开始爬行，12天睁眼，雌鼠35-50日龄性成熟，配种一般适宜在65-90日龄，妊娠期19-21天，每胎产仔8-12只。 第39页/共43页 （二）染毒途径：经口染毒，多用饲喂法 染毒期限：小鼠18个月、大鼠2年 （三）剂量设计与分组 3个剂量组和1个对照组，剂量参考亚慢性毒性作用阈剂量或LD50 （四）观察指标 基本同于亚慢性试验 重点观察亚慢性试验中的阳性指标。 第40页/共43页 三、慢性毒性作用的评价 最大无作用剂量≤人群可能摄入量的50倍