细胞衰老和死亡3.ppt

琼脂糖凝胶电泳呈现梯状条带 细胞凋亡在形态学上可以分为三个阶段 1,生长因子2，腺病毒3，半胱氨酸蛋白酶抑制剂 1，肿瘤坏死因子2，自由基3，放化疗 凋亡在一定条件下可以转化为坏死,但是,坏死是不可逆的被动过程. 细胞凋亡的分子机制 目前已知，细胞凋亡可分为caspase依赖和caspase不依赖两种机制，而caspase依赖的细胞凋亡又包括三种方式：①受体介导的细胞凋亡（外源通路）；②线粒体介导的细胞凋亡（内源通路）；③内质网介导的细胞凋亡（内源通路）。 1. 胱-天蛋白酶依赖的细胞凋亡（Caspase-dependent Cell Apoptosis） 1.1 死亡受体介导的细胞凋亡（Cell Apoptosis Mediated by Death Receptor） 由存在于细胞膜上的死亡受体介导，将外源型凋亡信号传递到细胞内，引发细胞调亡（图16）。常见的死亡受体包括：TNFR、Fas、DR3、DR4、DR5等。 由死亡受体介导的细胞凋亡信号调控过程 Fas 介 导 的 死 亡 信 号 死 亡 受 体 凋 亡 通 路 1.2 线粒体介导的细胞凋亡（Cell Apoptosis Mediated by Mitochondria） 多种物理、化学及生物学因素可导致线粒体外膜通透性增加，从而触发细胞凋亡过程。 跨膜电位改变与通透孔开放 由线粒体介导的细胞凋亡信号调控过程见图22~23。 线粒体凋亡通路 1.3 内质网介导的细胞凋亡(Cell Apoptosis Mediated by Endoplasmic Reticulum) 内质网在维持细胞内钙离子内环境稳定、膜蛋白的合成、修饰和折叠等方面有关键性作用。Caspase-12 位于内质网膜，是内质网应激诱导凋亡所必须的。 ??????? 内质网应激导致Ca2+释放进入胞浆，激活Calpain（钙激活的中性蛋白酶），水解并激活caspase-12 ，同时也导致caspase-7的激活，最终导致细胞凋亡。 2. 不依赖胱-天蛋白酶的细胞凋亡（Caspase-independent Cell Apoptosis） ??????? 实验证明，caspase的抑制不能阻断细胞凋亡的发生，表明细胞凋亡还以不依赖于caspase 的方式发生。不依赖caspase的细胞凋亡涉及到Bax诱导的细胞死亡，也涉及到其他蛋白酶，如钙蛋白酶、蛋白酶体及丝氨酸蛋白酶诱导的细胞死亡。 ??????? 丝氨酸蛋白酶与核酸内切酶白细胞弹性蛋白酶抑制剂的细胞死亡途径有关，这一途径的关键分子是LEI（丝氨酸蛋白酶抑制剂）。LEI在酸性pH或蛋白酶作用下，经翻译后水解加工，分子量降低，并伴随着核酸内切酶活性的出现，从而导致DNA的降解和细胞死亡。 细胞凋亡与医学的关系 与发育的关系 与疾病的关系 细胞凋亡过度，导致心血管疾病 细胞凋亡受阻，导致肿瘤的发生 细胞凋亡的研究将给自身免疫疾病带来真正的突破 神经系统的退行性病变 与细胞凋亡调控异常相关的疾病 * * * * 1961年，Leonard Hayflick利用来自胚胎和成体的成纤维细胞进行体外培养，发现：胚胎的成纤维细胞分裂传代50次后开始衰退和死亡，相反，来自成年组织的成纤维细胞只能培养15～30代就开始死亡。Hayflick等还发现，动物体细胞在体外可传代的次数，与物种的寿命有关；细胞的分裂能力与个体的年龄有关，由于上述规律是Hayflick研究和发现的，故称为Hayflick界限。 * * * * 　　 * * 　 * 不含功能基因 没有“帽子”结构的端粒，染色体与染色体之间就会出现端一端融合、降解、重排和染色体丢失等变化。 * * 内因：主要是由于衰老所致的自然死亡。外因：受外界物理化学生物等各种因子的作用超过了细胞的承受能力引起的细胞死亡。 现在学术界把细胞凋亡和PCD作为同义词并用，但有些学者认为两者有一定的区别，因为有些PCD不表现为细胞凋亡的形态学和生化特征，被称为非凋亡的程序性细胞死亡，而细胞凋亡也可见于PCD之外的病理状态。 轻微旋转 核断裂 染色质聚集边缘 胞膜形成小泡 胞质凝缩密度增加 凋亡小体 细胞凋亡的生化特征 膜内侧磷脂酰丝氨酸外翻到膜表面，线粒体膜电位消失，通透性改变，释放细胞色素C到胞浆，核酸内切酶活化，导致染色质DNA在核小体连接部位断裂，形成DNA降解成为约180bp-200bp整倍数的片段。 在细胞凋亡的过程中往往还有新的基因的表达和某些生物大分子的合成作为调控因子。 细胞凋亡的过程 1.凋亡的起始 细胞膜：