rap1gap对急性髓系白血病细胞生物学特性的影响及作用机理的分析-effect of rap 1 gap on biological characteristics of acute myeloid leukemia cells and analysis of its mechanism of action.docxVIP

Rap1GAP 对急性髓系白血病细胞生物学特性的影响及作用机理的研究中文摘要 面 CD11b 显著高于对照组，而 24h 两组之间无统计学差异。ATRA 诱导 NB4 细胞分 化 24h、48h，N1、N2 组 CD11b 表达显著增加为对照组 1.2 到 2.0 倍，而 72h 两组之 间区别不明显。NBT 结果和 CD11b 表达变化相似。⑤As2O3 处理 HL-60 和 NB4 细胞 24h，Rap1GAP 组即可观察到明显的凋亡细胞，而对照组细胞凋亡不明显。⑥Rap1GAP 高表达单克隆细胞株 H1 和 H2 的侵袭率显著高于对照组 HL-60 细胞侵袭率（P.001）。 H1 和 H2 分泌更多的 MMP-9，而 MMP-2 在两者之间差别不明显。H1 和 H2 的 MMP-9 转录水平增加，约为对照组细胞的 12 倍左右。第二部分空白对照组裸鼠注射后 1－2 周进食减少、体重下降、消瘦，2 周后 逐渐恢复正常，生存期大于 60 天以上无死亡。HL-60 组和 MOCK 组裸鼠尾静脉注射 细胞后，亦出现 1－2 周进食减少、体重下降、消瘦，2 周后渐渐恢复，但 6 周左右 再次出现进食减少，消瘦，逐渐衰竭死亡。HL-60 组平均存活时间为(44.25±2.12)d， MOCK 组平均存活时间为(43.62±2.32)d。R1 和 R2 组裸鼠发病时间较 HL-60 组提前， 注射细胞后 4－5 周即再次出现进食减少，体重下降，消瘦，衰竭死亡，3 只裸鼠出 现双下肢瘫痪。R1 组平均存活时间(32.00±1.85)d、R2 组平均存活时间(33.37±2.50)d。 HL-60 组和 MOCK 组裸鼠生存期无差别，R1 组和 R2 组裸鼠较 HL-60 组生存期缩短（P.05）。R1 组和 R2 组裸鼠共有 3 只裸鼠出现脑膜组织浸润，脑膜组织扩增出 Rap1GAP 和 MMP-9 基因，部分裸鼠骨髓涂片中检测到人白血病细胞，而其他脏器白 血病细胞浸润不明显。HL-60 组和 MOCK 组裸鼠各脏器白血病细胞浸润不明显，未 扩增出 Rap1GAP 和 MMP-9 基因。结论（1）Rap1GAP 在 AML 患者 BNMCs 中和急性髓系白血病细胞株（HL-60、NB4、SHI-1 和 U937）中均低表达。（2）外源性上调 Rap1GAP 不影响 HL-60 和 NB4 细胞增殖能力。（3）外源性上调 Rap1GAP 促进 HL-60 和 NB4 细胞诱导分化能力。（4）外源性上调 Rap1GAP 降低 HL-60 和 NB4 细胞抗凋亡能力。（5）外源性上调 Rap1GAP 增加 HL-60 体外和小鼠动物模型体内侵袭能力。综上所述，本研究发现相对于非恶性肿瘤血液病患者 Rap1GAP 在 AML 患者中文摘要R ap1GAP 对急性髓系白血病细胞生物学特性的影响及作用机理的研究 BMNCs 中低表达，利用慢病毒表达载体上调白血病细胞株 HL-60 和 NB4 中 Rap1GAP 水平（17-19 倍），我们发现 Rap1GAP 不影响 HL-60 和 NB4 细胞增殖能力，而促进 了 ARTA 诱导的 HL-60 和 NB4 细胞分化及 TPA 诱导的 HL-60 分化，而且上调 Rap1GAP 降低了白血病细胞株 HL-60 和 NB4 的抗 As2O3 诱导凋亡能力。而体外跨膜实验和白 血病动物模型结果显示上调 Rap1GAP 增加 HL-60 细胞侵袭力。白血病细胞株实验表 明 Rap1GAP 在 AML 发病过程中可能起到一定作用，具体复杂的作用和机制还需要 进一步研究。【关键词】Rap1GAP；增殖；分化；凋亡；侵袭；MMP-9；AML作者：邱婷婷 指导老师：陈子兴Rap1GAP 对急性髓系白血病细胞生物学特性的影响及作用机理的研究英文摘要The effect of Rap1GAP on the biological characteristics of acute myeloid leukemic cell lines and its possible mechansimAbstract【Objects】Rap1GAP belongs to GTPase-activating proteins (GAPs) family and plays an important role during the GDP-GTP cycles of Rap1.Guanine nucleotide exchange factors (GEFs) promote the release of GDP, rendering Rap1 to rebind a new GTP to stimulate the downst