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茶多酚对大鼠慢性缺氧损伤保护实验研究 　　摘要：大鼠在高原环境模拟舱内间断缺氧及注射CoCl2溶液以建立红细胞增多症模型，实验分4组：平原组、慢性缺氧组、高剂量TP+慢性缺氧组、低剂量TP+慢性缺氧组，研究茶多酚对慢性缺氧诱导的大鼠红细胞增多症及心肌缺氧损伤的影响，结果显示，茶多酚能够显著抑制缺氧大鼠的红细胞数、血红蛋白和红细胞压积的增加，降低骨髓增生程度，减小缺氧大鼠心室重量指数，增加缺氧大鼠Hermannnwillson指数，同时经茶多酚处理的缺氧大鼠心肌损伤程度较单纯缺氧组轻，提示，茶多酚对大鼠红细胞增多症有一定的预防作用，同时茶多酚还能减轻慢性缺氧对大鼠的心肌损伤程度。 　　关键词：茶多酚；缺氧；红细胞增多症；心肌损伤 　　中图分类号：R364.4　文献标识码：A　文章编号：1007－7847(2007)03－0268－05 　　 　　茶多酚(tea polyphenols，TP)是从茶叶中提取的多酚类物质，是茶叶的重要风味物质及生理活性成分，作为一种高效低毒的天然抗氧化剂，目前在食品工业中已得到广泛应用，除抗氧化作用外，临床及实验研究还发现TP可有效降低高血压、冠心病、恶性肿瘤、胃肠道疾病等多种患者血液的全血粘度、血浆粘度、红细胞压积等参数，改善血液流变及微循环，抑制患者血液高粘滞状态，从而避免了疾病的恶性循环，慢性缺氧可致红细胞增多症，高原缺氧所致高原红细胞增多症是一种常见的慢性高原病，多种疾病如慢性阻塞性肺病以及某些先天性心脏病等均可因机体缺氧导致红细胞增多症的产生，红细胞增多症患者红细胞过度增生，血液流变异常，血液具有浓、粘、聚的特点，此外，慢性缺氧和红细胞增多症还可引起全身多器官、组织损害，如心肌损伤，本研究运用低压性缺氧复合CoCl2复制大鼠红细胞增多症模型，探讨茶多酚是否对缺氧引起的红细胞增多症和心肌损伤具有预防和保护作用。 　　 　　1　材料与方法 　　 　　1．1　材料 　　1．1．1　实验动物 　　Wistar大鼠，雄性，体质量180～200g，SPF级，购于本校附属大坪医院动物所。 　　1．1．2　主要药品 　　茶多酚(tea polyphenols，TP)：纯度98％，其中儿茶素含量80％，表没食子儿茶素没食子酸??(Epigaltocatechin gallate，EGCG)含量45％，购于浙江东方茶业科技有限公司。 　　1．1．3　器材 　　乙二胺四乙酸二钾盐(Ethylenediaminete-traacctic acid-djpotassium salt，EDTA-K2)真空采血管为山东威高集团公司生产，全功能自动血流变仪为北京(普利生)LBY-N6B型，自动血细胞分析仪为日本Sysmex-21型。 　　 　　1．2　方法 　　1．2．1　动物饲养 　　标准大鼠饲料，购于本校附属大坪医院动物所，自由进食、进水，尤其保证充足饮水。 　　1．2．2　实验分组及给药 　　50只大鼠用随机排列表分成4组：对照组(平原组，海拔221m，n=8)、慢性缺氧组(n=14)、TP(20mg/kg.bw)+慢性缺氧组(高TP组，n=14)、TP(10ms/kg.bw)+慢性缺氧组(低TP组，n=14)，每两天一次皮下注射TP，平原对照组和慢性缺氧组给等量消毒蒸馏水。 　　1．2．3　红细胞增多症动物模型复制 　　慢性缺氧组、高TP组、低TP组置于高原环境模拟舱中，5000m、12h/d，40d；每两天一次腹腔注射CoCl2溶液5.5mg/kg.bw(单日给CoCl2，双日给TP)，模型复制结束时，在模拟高原4000m的低压氧舱内采取动脉血和取材。 　　1．2．4　取样及红细胞数、血红蛋白和红细胞压积测定 　　20％乌来糖麻醉后，经颈动脉导管取血，ED-TA-K2抗凝，然后用三分类血液分析仪测定大鼠血中红细胞数、血红蛋白和红细胞压积等值，采取动脉血后，立即取心、骨髓等组织备用。 　　1．2．5　骨髓涂片制作 　　取大鼠股骨骨髓制作涂片，并进行瑞氏染色，骨髓增生分级标准见表1。 　　 　　1．2．6　心肌肥大的判定指标 　　左心室重量指数(left ventricle weight index，LW)：(左心室重量+室间隔重量)／体重，右心室重量指数(right ventricle weight index，RW)=右心室重量／体重，Hermannwillson指数(Hermannwill-son index)=(左心室重量+室间隔重量)／右心室重量。 　　1．2．7　心肌病理切片制备 　　取右心室肌制作病理切片，HE染色，参照Rona等标准将心肌病理损伤分为4级，0°心肌无病变：肌纤维排列整齐，横纹清晰，胞核明显，无细胞肿胀：I°心肌出现散在