预防篇――兽医微生物学综合试验.doc

预防篇――兽医微生物学综合实验 实验一 病原性细菌常规检验技术 病原性细菌常规检验是兽医必须掌握的一项基本功，这直接关系疫病的发现与控制，本实验主要通过增菌培养基、选择培养基或鉴别培养基从病料中分离可疑沙门氏菌，经镜检，纯培养后，将其纯培养物回归实验动物，结合其生理生化实验指标及血清学反应特性作出最终判断，鉴定到属。 目的要求 了解采样、分离培养的基本原则。 熟悉沙门氏菌的形态及染色特性。 熟悉培养基的制备原则和方法。 掌握沙门氏菌的常规微生物学诊断方法。 内容与安排 阶段一 沙门氏菌的形态、培养特性的观察，实验材料的增菌与分离培养。 阶段二 识别菌落、作纯培养及三糖铁琼脂培养。 阶段三 进行动物实验与生化实验。 阶段四 血清学诊断。 阶段一 分离培养 材料与仪器 材料：不同种沙门氏菌致死动物的病料，氯化镁孔雀绿增菌液，四硫磺酸钠煌绿增菌液，亚硒酸盐胱氨酸增菌液，DHL平板，亚硫酸铋琼脂平板，常规染色用试剂及备品。 仪器：光学显微镜，温箱，天平，电热炉，高压蒸汽灭菌器，电热干燥箱。 实验方法 准备器材及配制本阶段所需培养基。 用病料中直接抹片，经革兰氏染色镜检观察可疑菌的形态。 取少量病料在无菌环境下，经研磨接种于氯化镁孔雀绿增菌液或四硫磺酸钠煌绿增菌液，42℃培养18-24h，或接种亚硒酸盐胱氨酸增菌液于37℃培养18-24h，同时将病料接种于亚硫酸铋琼脂平板和DHL平板，37℃