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水产养殖学专业优秀论文 微囊藻毒素对小鼠生殖系统的影响 关键词：微囊藻毒素 微囊藻细胞抽提液 生殖毒性 摘要：微囊藻毒素(microcystins，MCs)是一类具有生物活性的环状七肽肝毒素，具有明显的肝毒性，主要由铜绿微囊藻(Microcystis aeruginosa)产生。它是细胞内毒素，在蓝藻细胞死亡裂解后释放进水体内。近几十年，国内外关于微囊藻毒素危害野生动物、家畜、家禽的事件时有发生；同时，由有毒水华微囊藻或微囊藻毒素所引发的肝炎、肝癌及其它中毒事件也有一些报道。但微囊藻毒素对小鼠的生殖毒性研究目前只有很少的报道。本文主要研究了微囊藻毒素对小鼠的生殖毒性作用，为进一步研究MC对人类生殖健康可能的危害提供理论基础和参考数据。 实验用微囊藻采自河南省南湾水库，通过分离获得纯种，然后进行大量培养。收集藻浆，用沸水浴法提取微囊藻细胞抽提液。细胞抽提液经甲醇抽提、C18固相萃取柱初步纯化得到微囊藻毒素粗品。通过急性毒性实验获得微囊藻粗毒素和微囊藻细胞抽提液对小鼠的LD50。采用腹腔注射方法对小鼠染毒，结果发现微囊藻毒素的LD50为44.53(95％可信限42.60～46.62)μg/kg体重，而微囊藻细胞抽提液LD50为40.99(95％可信限38.99～43.15)μg/kg体重。在亚慢性毒性实验中，分别用1/5 LD50剂量微囊藻毒素和1/5 LD50剂量的微囊藻细胞抽提液对小鼠连续腹腔注射染毒21 d。末次染毒24h后取材，检测小鼠的体重、睾丸重量、血清睾酮浓度和睾丸组织结构损伤。染毒1d、3d、7d、21d分别取材，检测睾丸标志性酶活性。另外，在亚急性毒性实验中，用1/2 LD50剂量微囊藻毒素和1/2 LD50剂量的微囊藻细胞抽提液对小鼠连续染毒5d，继续喂养至第一次染毒后35 d检测精子畸形率。主要的实验结果如下： (1)亚慢性腹腔注射染毒21 d后，通过检测发现，微囊藻毒素和细胞抽提液处理组小鼠体重显著性下降，其原因可能是由于MC染毒后，MC影响了小鼠体内的一些代谢平衡，从而导致小鼠的体重降低。同时还发现，微囊藻毒素和细胞抽提液组小鼠睾丸重量显著性下降。另外，在组织学检测中发现，微囊藻毒素和微囊藻细胞抽提液损伤了小鼠睾丸组织结构，使精细胞时相发生变化，并打乱了曲精小管的细胞层次。这可能是因为微囊藻毒素通过血睾屏障，损伤了小鼠睾丸的正常结构并影响其正常机能。 (2)亚慢性腹腔注射染毒7 d，微囊藻毒素和细胞抽提液对小鼠睾丸标志酶(乳酸脱氢酶、乳酸脱氢酶-X、酸性磷酸酶和山梨醇脱氢酶)无显著性影响，微囊藻毒素和细胞抽提液的暴露21 d后，则显著提高了小鼠睾丸标志酶的活性，可能是因为微囊藻毒素干扰小鼠某些代谢途径，从而影响精子的发生和成熟过程。 (3)微囊藻毒素和细胞抽提液对小鼠血清睾酮浓度和精子畸形率无显著性影响。 本实验结果表明，微囊藻毒素不仅影响小鼠睾丸标志酶活性，干扰其正常的生长发育，而且对小鼠睾丸结构和睾丸正常的精子发生和成熟过程产生毒性作用。该结果提示，微囊藻毒素对小鼠具有明显的生殖毒性。因此，微囊藻毒素对人类生殖健康的可能危害值得关注。 正文内容 微囊藻毒素(microcystins，MCs)是一类具有生物活性的环状七肽肝毒素，具有明显的肝毒性，主要由铜绿微囊藻(Microcystis aeruginosa)产生。它是细胞内毒素，在蓝藻细胞死亡裂解后释放进水体内。近几十年，国内外关于微囊藻毒素危害野生动物、家畜、家禽的事件时有发生；同时，由有毒水华微囊藻或微囊藻毒素所引发的肝炎、肝癌及其它中毒事件也有一些报道。但微囊藻毒素对小鼠的生殖毒性研究目前只有很少的报道。本文主要研究了微囊藻毒素对小鼠的生殖毒性作用，为进一步研究MC对人类生殖健康可能的危害提供理论基础和参考数据。 实验用微囊藻采自河南省南湾水库，通过分离获得纯种，然后进行大量培养。收集藻浆，用沸水浴法提取微囊藻细胞抽提液。细胞抽提液经甲醇抽提、C18固相萃取柱初步纯化得到微囊藻毒素粗品。通过急性毒性实验获得微囊藻粗毒素和微囊藻细胞抽提液对小鼠的LD50。采用腹腔注射方法对小鼠染毒，结果发现微囊藻毒素的LD50为44.53(95％可信限42.60～46.62)μg/kg体重，而微囊藻细胞抽提液LD50为40.99(95％可信限38.99～43.15)μg/kg体重。在亚慢性毒性实验中，分别用1/5 LD50剂量微囊藻毒素和1/5 LD50剂量的微囊藻细胞抽提液对小鼠连续腹腔注射染毒21 d。末次染毒24h后取材，检测小鼠的体重、睾丸重量、血清睾酮浓度和睾丸组织结构损伤。染毒1d、3d、7d、21d分别取材，检测睾丸标志性酶活性。另外，在亚急性毒性实验中，用1/2 LD50剂量微囊藻毒素和1/2 LD50剂量的微囊