shrna诱导brms1基因沉默调控卵巢癌细胞侵袭转移的实验分析-shrna induces br ms1 gene silencing to regulate invasion and metastasis of ovarian cancer cells.docxVIP

广州医 广州医学院硕士学位论文 shRNA 诱导 BRMS1 基因沉默调控卵巢癌细胞侵袭转移的实验研究 PAGE PAGE 3 结果： 1. 成功筛选出高表达 BRMS1 的卵巢癌细胞株：OVCAR3。 2. 重组载体 BRMS1-shRNA 经酶切鉴定可以被 BamHⅠ切开，位点正确，而不 能被 PstⅠ切开，进一步测序结果与实验设计合成的 pGPU6/GFP/Neo-BRMS1 靶向目 标序列完全一致，成功构建了 pGPU6/GFP/Neo-BRMS1 重组质粒。 3. BRMS1-shRNA 转染卵巢癌 OVCAR3 细胞，经 G418 稳定筛选后，Q-PCR 和 Western blot 检测显示，干扰组细胞中 BRMS1-mRNA 和蛋白表达抑制率分别为 85.15%和 46.67%，差异有统计学意义（P0.01），成功构建了稳定沉默 BRMS1 基 因的卵巢癌细胞株。 4. BRMS1-shRNA 转染卵巢癌细胞后，体外粘附、侵袭、迁移和诱导血管形成能 力较对照组明显增强，差异有统计学意义（P0.05）。 5. BRMS1-shRNA 转染卵巢癌细胞后，Q-PCR 结果显示，CXCR4 mRNA 表达上 调，是空白对照组的 1.78 倍，差异有统计学意义（P0.05）。Western blot 结果显示， CXCR4 和 IL-6 蛋白在干扰组中表达上调，分别是对