不同浓度IL-1β和TGF-β1对大鼠肋软骨细胞影响.docVIP

不同浓度IL-1β和TGF-β1对大鼠肋软骨细胞影响 　　[摘要]目的：研究人白细胞介素-1β（IL-1β）和转化生长因子-β1(TGF-β1)对体外培养的SD大鼠肋软骨细胞功能的影响。方法：采用免疫组织化学检测不同剂量IL-1β和TGF-β1作用48h后软骨细胞Ⅱ型胶原和蛋白多糖表达水平。采用RT-PCR方法检测细胞Ⅱ型胶原、aggrecanase-1,2、aggrecan的 mRNA的表达水平。结果：IL-1β可以促进软骨细胞aggrecanase-1,2的表达，从而降低多聚蛋白聚糖的含量，破环细胞外基质结构，减少II型胶原的含量，使细胞呈现去分化的表现，对软骨细胞起负性调节作用。低浓度的TGF-β1对软骨细胞起保护的作用；高浓度的TGF-β1（100ng/ml）在促进蛋白多糖表达的同时也促进软骨细胞蛋白多糖的降解，从而打破软骨的代谢平衡，起负性调节的作用。 　　[关键词]IL-1β；TGF-β1；软骨细胞 　　[中图分类号]Q813.1[文献标识码]A[文章编号]1008-6455（2008）08-1166-05 　　 　　The effects ofIL-1β and TGF-β1 on rat costochondral chondrocytes 　　WANG Li, WANG Zheng-hui, YANG Zhuang-qun, LI Li-xia, TU Jun-bo, LI Guo-guang 　　(Department of Oral and Maxillofacial Plastic Surgery, Stomatological Hospital, Xian Jiaotong University, Xian 710004, Shaanxi, China) 　　 　　Abstract:ObjectiveIn order to study IL-1βand TGF-β1 have what effects on SD rat chondrocyte cell.MethondsDifferent dosis of IL-1βand TGF-β1 was used to deal chondrocyte cell 48 hours.Then aggrecan and collagen II of those celluar and the control group were detected by immune-histochemistry. RT-PCR methondwas used to assessment celluar aggrecan and collagen II and aggrecanase-1,2 mRNA expressing.ResultsIL-1βincreases the expressing of aggrecanase-1,2 accordingly decrease the content of aggrecan, reduce the celluar character collagen II ,destroy the integrity of ECM. IL-1βhave negative effects on chondrocytes. Low-grade TGF-β1 have energetic effects on chondrocytes, altus improve the content of aggrecan also degration the aggrecan ,finally breakdown the balance of ECM, have negative effects on chondrocytes. 　　Key words：IL-1β; TGF-β1; chondrocytes 　　 　　在整形外科领域，软骨组织的缺损修复以及重建一直是一个难题。 组织工程概念的提出为整形外科领域提供了一种新的策略。将体外扩增的软骨细胞接种至合适的支架材料上进行培养，以获得组??工程软骨。然而，体外扩增的软骨细胞存在着去分化的现象，机制不明。细胞因子在影响细胞分化方面起着重要的作用，其中IL-1，TGF-β1的作用研究较多，但是各个学者看法不一。本文采用免疫组织化学染色， RT-PCR等方法探讨IL-1β和TGF-β1对软骨细胞Ⅱ型胶原，多聚蛋白聚糖酶-1,2(aggrecanase-1,2) 及蛋白多糖(aggrecan)表达量的影响。 　　 　　1材料和方法 　　 　　1.1 材料：体重约120g的雌性SD大鼠（由西安交通大学动物中心提供）。主要试剂与仪器：高糖 DMEM培养基、胎牛血清（ Invitrogen公司