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基因治疗病毒载体系统 　　[摘要]基因治疗是向靶细胞或组织引入外源基因片段，通过纠正或补偿缺陷基因，关闭或抑制异常表达的基因，从而达到治疗目的的一种生物医学技术。病毒载体是一种可将遗传物质带入细胞的分子生物学工具，其原理是利用病毒具有传送其基因组进入其他细胞，进行感染。在基因治疗中，因组织的靶向性，特异性，转染表达等不同，选择使用不同的病毒载体，以下综述了逆转录病毒载体、腺病毒载体、腺相关病毒载体、单纯疱疹病毒载体、α-病毒载体以及痘病毒载体，并提出了病毒载体的发展方向和必要性。 　　[关键词]基因治疗；载体；病毒；感染；基因表达 　　[Abstract]Gene therapy is to cure the inherited or acquired diseases through delivering normal genes to targeted cells and replacing the unorderly genes. Viral vectors have different capabilities as gene delivery vehicles for vaccines and immunotherapeutics.The principle is that virus can deliver the gene to other cells by infection. The methods used so far were reviewed in viral systems including retrovirus, adenovirus, adeno-associated virus, herpessimplex virus, α-virus and vaccinia virus.Also, the development of virus vectors for gene therapy was reviewed in this paper. 　　[Key words]gene therapy; vector; virus; infection; gene expression 　　基因治疗是当代医学和生物学的一个新的研究领域，始于20世纪80年代。它主要是向靶细胞或组织中引入外源基因DNA或RNA片段，以纠正或补偿患者基因的缺陷，关闭或抑制异常表达的基因，从而达到治疗疾病的目的。1990年第一次把腺嘌呤脱氨酶（ADA）基因成功导入到人体内的T淋巴细胞中用来治疗ADA基因缺失病，由此标志着人类历史上基因治疗时代的开始。本文主要介绍基因治疗中常用的6种病毒载体的生物学特性。目前，基因治疗已从遗传病扩展到非遗传病领域，例如：传染病，肿瘤，神经系统疾病，免疫缺陷病等。 　　1逆转录病毒载体 　　逆转录病毒（retrovirus.RV）为单链RNA病毒，是病毒载体中应用最早，研究成熟，目前被广泛应用的载体。逆转录病毒是基因组为8.5kb的小RNA，进入细胞后，病毒RNA即逆转录为双链DNA，并整合到细胞基因组中。将水泡性口炎病毒糖蛋白（VSV-G）整合于逆转录病毒包膜中能加速各??宿主细胞对其进行膜融合和内吞，具有广泛的宿主范围和更高的转染效率，可高效的转染静止细胞，且能抵抗血清补体灭活的作用[1]。为了提高逆转录病毒感染靶细胞的特异性，降低其潜在的危险性，可以在原来的病毒Env蛋白上接上一段具有特异靶向的多肽，目前应用较多的是单链可变区抗体（acFV）；还可通过插入组织特异启动子实现靶向表达。第三代包装细胞系Ψ-crip和Ψ-cre使载体与包装细胞间至少需要发生四次同源重组才可能产生有复制能力的逆转录病毒，提高了逆转录病毒载体的安全性。逆转录病毒载体有感染效率高、外源基因整合到细胞基因组中、可长期表达而不产生任何有免疫原性的病毒蛋白等优点。但目前，基因转导所用的逆转录病毒载体为野生型逆转录病毒的改构形式，保留感染靶细胞能力而去除复制能力，仍具有一定危险性。 　　慢病毒（Lentivirus）也属于逆转录病毒家族，是一类很有前途的基因转移载体。它既可以感染分裂细胞又可感染非分裂细胞。该病毒载体能整合入靶细胞基因组、不需要反复转导细胞。最为人们熟知的慢病毒是人免疫缺陷病毒（HIV），复制缺陷型HIV可被用于基因转移。HIV具有简单逆转录病毒的3个基因（gap、pol和env）。此外还有5种辅助蛋白基因（tet、rev、vpr、nef和vif）。以HIV-1为例，其进入细胞需要结合两种细胞表面受体。这种趋化因子受体可能是CCKR4（主要是T细胞表达）或CCKR5（主要是巨噬细胞表达）。利用HIV-1的这一特性可使基因转移具有特殊的靶向[2]。虽然使用缺陷性病毒时靶细胞不表达病毒蛋白，人们对