免疫印迹法实验技术.ppt

免疫印迹法的实验技术（Western Blot 印迹方法）; 一、Western-Blot简介;;;实验原理;;;蛋白免疫印迹组成;实验步骤;;二、蛋白样本的制备和浓度的测定;;蛋白浓度的测定;方法：;BCA法工作原理;SDS电泳;;实验前的准备;根据待测样品的蛋白质分子量选择分离胶和浓缩胶的浓度.（一般浓缩胶为5%，分离胶根据所测蛋白分子量定） ;作用;实验步骤;;注意事项;;四、转 膜;;转膜通常有两种方法：毛细管印迹法和电泳印迹法。电泳印迹效率更高。这种方法是用有孔的塑料和有机玻璃板将凝胶和硝酸纤维素膜夹成三明治形状，而后浸入两个平行电极中间的缓冲液中进行电泳，选择适当的电泳方向就可以使蛋白质离开凝胶结合在膜上。转移后的膜就称为一个印（blot），用于对蛋白质的进一步检测。;实验前的准备;;实验步骤;;;;实验注意事项;五、固相免疫检测;;;实验前的准备;实验步骤;曝光及洗片方法;实验注意事项;Western Blot常见问题分析;;;;Add your company slogan