姜黄素对人卵巢癌细胞株skov-3增殖和凋亡的影响-effect of curcumin on proliferation and apoptosis of human ovarian cancer cell line skov - 3.docxVIP

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姜黄素对人卵巢癌细胞株skov-3增殖和凋亡的影响-effect of curcumin on proliferation and apoptosis of human ovarian cancer cell line skov - 3

学位论文独创性声明本人声明,所呈交的学位论文系在导师指导下本文独立完成的研究成果。 文中任何引用他人的成果,均已做出明确标注或得到许可。论文内容未包含 法律意义上已属于他人的任何形式的研究成果,也不包含本人已用于其他学 位申请的论文或成果。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在 论文中作了明确的说明并表示谢意。本文如违反上述声明,愿意承担以下责任和后果:1、交回学校授予的学位证书;2、学校可在相关媒体上对作者本人的行为进行通报;3、本文按照学校规定的方式,对因不当取得学位给学校造成的名誉损害,进 行公开道歉。4、本人负责因论文成果不实产生的法律纠纷。论文作者签名:日期:年月日学位论文版权使用授权书本人完全了解山西医科大学有关保留、使用学位论文的规定,同意学校保 留或向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版,允许论文被查阅和 借阅;本人授权山西医科大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关 数据库进行检索,可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文和汇编本学 位论文。本人离校后发表或使用学位论文或与该论文直接相关的学术论文或成果 时,署名单位仍然为山西医科大学。(保密论文在解密后应遵守此规定)论文作者签名:日期:年月日 指导教师签名:日期:年月日(本声明的版权归山西医科大学所有,未经许可,任何单位及任何个人不得擅自使用)前言卵巢恶性肿瘤是女性生殖器三大恶性肿瘤之一。由于卵巢位于盆腔的深部,早期症状 不明显,在临床诊断时,70%的卵巢癌已是晚期[1]。手术加以化疗是卵巢癌治疗的主要手 段。如何提高疗效、减低不良反应 ,进一步提高患者的生存率,改善患者生存质量,成为 当前研究的重点。姜黄素在卵巢癌的治疗方面已日益受到人们的重视。姜黄素(Cur cumin)是从姜科黄属植物姜黄(Curcuma longa)根茎中提取的一种植物多酚, 姜黄素分子式为 C21 H20O6,相对分子质量 368.37,熔点 183℃。 姜黄素既有 2 个邻甲 基化的酚,又有一个β -二酮功能基团,姜黄素的这种结构特性与其多种生物活性都高度相 关。 姜黄素几乎不溶于水,易溶于乙醇、 碱、 醋酸、 丙酮和氯仿等溶剂。姜黄素受可 见光和紫外线影响,会发生光降解。姜黄素具有广泛的药理作用,如抗氧化、抗凝、抗人类 免疫缺陷病毒、抗菌、 解痉、抗肿瘤、抗突变等作用[5]。姜姜黄素可以诱导卵巢癌细胞凋 亡,抑制卵巢癌细胞增殖,调控肿瘤细胞周期,因其能抑制多种肿瘤细胞系的生长[6]( 如 小鼠肉瘤 S180、人结肠癌细胞 HT-29、人肾癌细胞 293、人肝癌细胞 Hep G2 等),成为 当今的研究热点之一。Survivin 是近来发现的人类凋亡抑制蛋白家族(inhibitor of apoptosis family, IAPs)的 成 员之一 , Survivin 具有肿瘤特异性,与肿瘤细胞的分化增殖密切相关,具有抑制细胞凋亡 和调节细胞周期和细胞分裂的双重功能。近年来发现的细胞内蛋白酶家族- Caspase (半胱 氨酰天冬氨酸酶, cysteinyl aspartate specific pro-teases)家族, 在细胞死亡信号传导过程中 起核心作用[3] 。Caspase- 3 是 Caspases 家族中最重要的细胞凋亡执行者之一。 一旦 Caspase- 3 被激活就会导致细胞死亡, 因此被称为死亡蛋白酶[4] 。Survivin 通过与下游凋 亡执行者 Caspase-3 结合对其活性产生直接抑制效应,阻断细胞的凋亡过程[18]。而经典的 两条凋亡通路(一是由线粒体释放 cyto-c 介导的线粒体依赖性途径,二是由 Fas 介导的死亡 受体途径)最后都激活 Caspase 蛋白酶家族导致凋亡的发生,因此 Survivin 使转化细胞对凋 亡刺激失敏,从而使肿瘤细胞异常存活[19-21]。本实验用不同浓度的姜黄素干预卵巢癌细胞株 SKOV-3 的生长,观察细胞凋亡及抑制 情况。检测凋亡相关蛋白 Survivin;Caspase-3 随不同浓度姜黄素的表达变化情况。本实验为 卵巢癌中药治疗的临床应用提供理论依据和实验基础。一、材料材料和方法1、肿瘤细胞株:卵巢癌细胞株 SKOV-3 来源于人卵巢浆液性腺癌,购自武汉博士德生物工 程有限公司。2、药品及主要试剂:姜黄素购自美国 Sigma 公司;细胞培养基 1640 购自美国 GIBCO 公 司;小牛血清为杭州四季青生物工程材料有限公司产品;四甲基偶氮唑蓝(MTT)购自美 国 Sigma 公司;二甲基亚砜(DMSO)为美国 Sigma 公司产品;SABC 免疫细胞化学试剂 盒以及 PI 显色试剂盒均购自南京凯基生物工程有限公司。二、方法1、细胞培养:将人卵巢癌细胞株 SKOV-3 培养于 RPMI

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