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有机化学专业优秀论文 二茂铁修饰吡唑并杂环酮类小分子化合物的设计、合成、结构与生物活性研究 关键词：化学遗传学 二茂铁 吡唑并杂环酮 吡唑并哌嗪酮 吡唑并噁嗪酮 生物活性 小分子化合物 摘要：化学遗传学是20世纪后半叶发展起来的化学与生物学交叉学科，是利用小分子化合物改变（抑制或激动）同源蛋白质功能的手段来研究基因功能的科学，结合结构生物学，分子生物学的迅猛发展，目前已经发展成为在分子水平上研究生命过程与发现新药的重要手段。化学遗传学存在反向化学遗传学与正向化学遗传学策略，正向化学遗传学通过不同的细胞模型筛选没有靶向的小分子化合物库来发现相应蛋白靶标与活性小分子，是从研究化合物对细胞形态学、生长和外在表现等显型的改变来发现相应的基因型的方法，不但可以发现活性小分子，而且可以利用这些活性小分子“钓出”与之相互作用的蛋白质，继而通过研究蛋白质的功能发现基因功能。 有机合成化学作为化学遗传学的重要组成部分，在化学遗传学研究中承担建立开展化学遗传学研究所必需的结构多样的小分子化合物库的关键任务，利用这些化合物库人们就可以建立不同的生物学模型系统地寻找和筛选能够作用于蛋白质或细胞的具有生物活性的化合物，以此为工具就可以揭示生命的基本活动规律与发现候选药物。 本论文在正向化学遗传学指导下，研究了二茂铁修饰的吡唑并杂环酮类小分子化合物库的多样性合成与初步的生物活性。在结构多样性方面，我们通过改变杂环酮的多样性，建立了一个包含6，7-二氢吡唑并哌嗪酮、吡唑并哌嗪酮与吡唑并噁嗪酮三类结构的吡唑并杂环酮类小分子化合物库；同时，我们依据二茂铁修饰药物在生物方面的重要应用，在吡唑杂环上引入二茂铁基团，期望利用二茂铁基团的独特结构与性质，能够在将来的化学遗传学研究中发现新的药物靶标蛋白和生物作用机理。在生物活性测试中，我们通过应用人A549肺癌细胞模型筛选该库得到了数个活性小分子化合物，并以其中三个效果突出的8d，8e与8f化合物作为化学工具去研究其对人A549肺癌细胞生长的影响，发现5-烷基-2-二茂铁基-6，7二氢吡唑并[1，5-a]哌嗪-4（5H）酮可以有效的诱导A549细胞凋亡。 本论文包括三部分内容： 一.5-烷基-2-二茂铁基-6，7二氢吡唑并[1，5-a]哌嗪-4（5H）-酮的合成，结构表征和初步的生物活性评价。 目标化合物以1-（2-溴乙基）-3-二茂铁基-5-羧酸乙脂吡唑与过量非芳香伯胺为原料在乙腈溶剂中经卤代烃亲核取代和胺酰化反应“一锅法”缩环合成。所有目标化合物均通过IR，1H NMR，13C NMR，HRMS表征，部分化合物通过单晶X射线衍射表征。利用目标化合物进行了对人肺A549癌细胞生长抑制活性评价，结果表明所有化合物均表现出良好的抑制活性，其中化合物8d，8e，8f对A549癌细胞生长抑制效果优于临床常用抗癌药物5-氟尿嘧啶。同时，在合成重要中间体1-（2-溴乙基）-3-二茂铁基-5-羧酸乙脂过程中，我们分离得到了吡唑N烷基化取代的两个位置异构体，并首次用单晶X射线衍射法确认了目标产物异构体6的精确结构，从而可以准确的比较两种异构体在1H NMR谱图上的差别。 二.2-二茂铁基-吡唑并[1，5-α]哌嗪-4（5H）-酮的合成，结构表征与生物活性评价。 目标化合物以1-（2-芳香基-2-羧甲基）-3-二茂铁基-5-羧酸乙脂吡唑与过量非芳香伯胺为原料在甲苯溶剂和高温（160-190摄氏度）封管条件下一步缩环合成，所有化合物均通过IR，1H NMR，13C NMR，HRMS表征，部分化合物通过单晶X射线衍射表征。同时，我们评价了目标化合物对A549肺癌细胞的生长抑制活性，结果表明部分化合物具有良好的抑制活性。 三.2-二茂铁基-6-取代-4氢-吡唑并[5，1-c][1，4]噁嗪-4-酮衍生物的合成和结构表征。 目标化合物以1-（2-烷基或芳香基-2-羧甲基）-3-二茂铁基-5-羧酸乙脂吡唑为原料在软的路易斯酸溴化镁乙醚存在下自身缩环合成，所有化合物均通过IR，1H NMR，13C NMR，HRMS表征，部分化合物通过单晶X射线衍射表征。应用软路易斯酸溴化镁乙醚试剂活化羰基，生成烯醇式并与羧酸脂环化合成噁嗪酮杂环的方法是我们首次发现和报道的合成方法。 总之，本文开发了一系列有效的新颖的合成方法，建立了一个多样性的二茂铁修饰吡唑并杂环酮类小分子化合物库，并用人A549肺癌细胞模型筛选出数个活性小分子化合物，为进一步的化学遗传学研究建立了必需的化学工具。本论文的研究成果可以为相关的化学遗传学研究提供物质基础，为吡唑并杂环酮类小分子化合物库的建立和化学遗传学研究开创起点和方法；同时，利用二茂铁基团的独特结构和性质，亦有望在进一步的化学遗传学研究中，发现新的药物靶标蛋白和作用机理，鉴于此类化合物具