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实验3 吸烟对胎鼠神经发育影响
吸烟对胎鼠神经发育的影响
-----------设计性、开放性实验
实验动物
SD大鼠
共15只
12只雌鼠 3只雄鼠
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实验器材
自制烟熏箱 55cm×40cm×40cm
自制烟灰缸
红三环香烟共五条
手套四副
打火机若干
饲料、垫料等饲养用具
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第一阶段:熏烟
实验组
对照组
6只雌鼠
每天两次,每次10支
以3+3+4方式熏
共10天
6只雌鼠
不处理
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第二阶段:合笼
合笼:实验组雌鼠2只+雄鼠1只放于同一笼 共三笼 共三天晚上
对照组同上
注:白天须将雌雄鼠分开
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检查精子
分别于第二天清晨检查阴道栓和阴道涂片
★阴道栓在托盘里找,为半透明黄白色胶体
★阴道涂片:在低倍镜下可见满视野的线状精子,高倍镜下可见精子头部有钩
(但理论上,只要见到一个精子可认为怀孕)
注:熏烟可能对大鼠受孕率有影响
怀孕之后的雌鼠与未怀孕的须分开养
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第三阶段:剖腹产并取材
于雌鼠怀孕的第21天早上剖腹产
每只约怀有8-12只子鼠
取出子鼠后,放入甲醛固定
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待母鼠全部剖腹完,取子鼠脑组织,编号并固定
择日包埋、切片
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注意事项
●要将剖腹产日期计算准确,否则其他雌鼠会将顺产出生的子鼠吃掉
●检查雌鼠怀孕可以每3天称其体重
●子鼠可以称其体重,辨其性别
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实验操作
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讨论
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