养殖石斑鱼虹彩病毒感染症-养殖石斑鱼(Epinephelusspp.)虹彩样病毒..ppt

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养殖石斑鱼虹彩病毒感染症-养殖石斑鱼(Epinephelusspp.)虹彩样病毒.

養殖石斑魚(Epinephelus spp.)虹彩樣病毒(iridovirus-like)感染症 指導教授:古鎮鈞 學生:王茂麟 學號:1092407027 石班魚分類 脊索動物亞門 Subphylum Vertebrata 條鰭魚綱 Actinopterygii  新鰭亞綱 Neopterygii   鱸形目 Perciformes    鱸亞目 Percoidei      鮨科 Serranidae     石斑魚屬 Epinephelus       鱸滑石斑魚 Epinephelus tauvina 前言 石斑魚(Epinephelus spp.)為本省重要養殖魚種之一。而放養魚苗常因本地產量不足,而需自東南亞國家進口。 1983年,於美國Boston地區發生養殖之goldfish (Carassius auratus L)被iridovirus所感染 (Berry et al., 1983)。 虹彩樣病毒(iridovirus-like)感染症,會引起澳洲的河鱸(Perca fluviatilis)造血組織壞死及大量死亡,故本病又稱之為流行性造血組織壞死症(epizootic haematopoietic necrosis;EHN) (Langdon et al., 1986 ; 1987)。 1986年,養殖的虹鱒(Salmogairdneri Richardson)亦發生類似的病原感染 (Langdon et al., 1988) 。 1991年,於日本Shikoku地區養殖之嘉鱲(Pagrus major),因感染一種型態上屬於Iridoviridae的病毒,造成魚隻嚴重貧血,並引起20-60%之死亡率 (Kiyoshi et al., 1992)。 1994年,新加坡近海箱網養殖之石斑魚(Epinephelus tauvina),亦因感染一種可能為Iridoviridae的病毒性疾病引起大量魚苗與成魚的死亡;同時間馬來西亞亦發生類似疫情 (Chua et al., 1994)。 本省自1993年起,由東南亞進口之金目鱸(Latus calcarifer)魚苗以及成魚,均分別感染虹彩樣病毒(iridovirus-like),而該病毒型態特徵以及魚體病變與澳洲鱸科魚類所感染之病毒時很相似 (Langdon et al., 1987;1988) 。 本次石斑魚所感染之病原,推測可能與上述地區,特別是日本及新加坡,所發生之病毒感染症有密切關係。 金目鱸分類 脊索動物亞門 Subphylum Vertebrata  條鰭魚綱 Actinopterygii  新鰭亞綱 Neopterygii   鱸形目 Perciformes    鱸亞目 Percoidei     尖嘴鱸科 Latidae      尖吻鱸屬 Lates      尖吻鱸 Lates calcarifer 材料與方法 疫情 病魚解剖、寄生蟲檢查 細菌分離 組織病理檢查 (光學顯微鏡、電子顯微鏡) 感染試驗(同居感染、動物接種、水質監測) 疫情 病魚解剖、寄生蟲檢查 細菌分離 組織病理檢查(光學顯微鏡) HE (hematoxylin eosin) 染色 蘇木紫 伊紅染色,常用於組織切片;hematoxylin 可將細胞核、軟骨等嗜鹼性組織染色, eosin則可將細胞質、紅血球、纖維素等嗜酸性組織染色。 紅血球對eosin的吸收性極佳,可輕易染上鮮明之紅色。 PAS (periodic acid Schiff) 染色 過碘酸染色;在蛋白質上的糖分子,會因過碘酸氧化而產生醛基,其與 Schiff’s reagent 結合會產生紫紅色堆積物。 可將多醣類染成紫紅色;在病理組織學上用於檢測細胞內的異生物,多醣體變性等。 Carnoy’s 固定液 為甲醇:冰醋酸體積比 3:1 調配而成;使用需臨時配製,長時間放置會影響固定效果。 固定時間為 15分-24小時,於低溫、室溫均可使用。 必要時可改變二者比例。 AO (acridine orange) 為螢光染劑,可染上活細胞;由於此染劑是染包核內的 chromatin,故正常的細胞核以及 apotosis 早期的胞核在螢光顯微鏡下會呈現綠色。 Feulgen 染色法 將 DNA 經 1N HCl 於 60。C 水解後,除去核酸中的嘌呤鹼,使去氧核醣中的醛基釋出,再將之移入 Schiff’s reagent 中,試劑即會與醛基反應呈紫紅色。 1942 年由 Feulgen 提出,為 DNA 之特異性檢測法。 組織病理檢查(電子顯微鏡) 感染試驗(同居感染) 感

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