组织工程骨-软骨复合组织种子细胞获取与培养.docVIP

组织工程骨-软骨复合组织种子细胞获取与培养 　　[摘要]目的：探索体外培养组织工程骨-软骨复合组织种子细胞的条件，并观察其部分生物学活性。方法：采用机械-酶消化法对3周龄新西兰大白兔耳软骨和关节软骨消化来获得软骨细胞，采用全骨髓贴壁法来获得骨髓间充质干细胞，对两种细胞进行原代和传代培养，通过倒置相差显微镜观察细胞形态、绘制生长曲线、免疫组化染色等对细胞进行生物学特性分析。结果：原代培养的软骨细胞以多角形或三角形为主，传代3次以后出现去分化。形态学和免疫组化显示细胞3代以内可以保持表型稳定，具有较强的增殖及分泌细胞外基质的能力，而且耳软骨及关节软骨细胞在实验中没有表现出明显的生物学差别。采用贴壁筛选法获得的BMSCs呈长梭形或多边形，生长曲线呈“S”形，Ⅱ型胶原免疫组化染色阳性，细胞生长增殖能力旺盛。结论：体外分离培养的软骨细胞和骨髓间充质干细胞符合组织工程要求，能够作为骨-软骨复合组织的种子细胞。 　　[关键词]组织工程；骨髓间充质干细胞；软骨细胞；种子细胞 　　[中图分类号]Q813.1 [文献标识码]A [文章编号]1008-6455（2012）05-0748-04 　　 　　Obtainment and culture of seeding cells of tissue engineered osteochondral composites 　　LIU Pen