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- 2018-06-07 发布于福建
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蛋白质定量分析研究进展
蛋白质定量分析研究进展
【关键词】蛋白质;定量分析;研究
【中图分类号】R【文献标识码】A【文章编号】1007-8517(2009)08-0049-02
1蛋白质定量检测的生物化学方法
1.1凯氏定氮(Kjeldahl’s Method)及分光光度法利用蛋白质含氮量进行检测的经典方法,优点是定量准确,但操作烦琐,仅用于标定蛋白质标准品和校正其他测定方法。凯氏定氮法有半微量法、微量法及全量法。样品与H2SO4一同加热消化,分析有机物,释放出的NH3与结合,碱化蒸馏使氨游离,硼酸吸收,HCI或H2SO4标准溶液滴定,从而计算蛋白质的含量。该方法是以Hantzsch反应为原理所建立的一种测试蛋白质含量的新的分光光度法。适用于各类食品中蛋白质的测定,且不需要特殊的凯氏定氮装置。取样且少,消化时间短,精密度高准确度好,适用于大批样品同时测定,亦适用于微量蛋白质分析,是一种蛋白质快速、准确测定的新途径。
1.2双缩脲法(Biuret Assay)双缩脲法简便易行,但检测灵敏度相对较低,最低测定值100μg。必须在测定前先使蛋白完全沉淀,除去干扰物质,才能得到较准确的结果。除三氯乙酸作沉淀剂外.还可用钨酸、磷钨酸和Tsuchiya试剂,双缩脲法优点是对白、红蛋白产生颜色反应相近、干扰物质少,不受温度的影响。但灵敏度低,0.01吸光度相当于l66.7
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