镇安合剂质量标准研究.docVIP

镇安合剂质量标准研究 　　(南京中医药大学，江苏南京210046) 　　摘要：目的：建立镇安合剂质量控制方法。方法：采用薄层色谱法对制剂中天麻、地龙、钩藤进行定性鉴别；对组方中有效成分芍药苷用RP－HPLC法进行定量分析。结果：薄层色谱中斑点清晰，易于识别；RP－HPLC法精密度、重现性良好，芍药苷在0.768～3.84μg内均较好的线性关系，平均加样回收率为100.78％，RSD为2.29％。结论：在本研究基础上制定的质量标准可以控制本品的内在质量，其方法是可行的。 　　关键词：镇安合剂；芍药苷；RP－HPLC；薄层色谱法 　　中图分类号：R284.1　文献标识码：A 文章编号：1673-7717(2007)05-0981-03 　　 　　镇安合剂由白芍、天麻、地龙、钩藤等药物组成，具有滋阴平肝、清心安神、开郁化痰、熄风止痉的功效，主要用于肾虚肝亢，风痰内扰型小儿多发性抽动症。采用薄层色谱法对方中天麻、地龙、白芍进行薄层鉴定。白芍是方中主药，因此实验选定芍药苷为该制剂的含量测定项目，以制定该制剂的质量标准。 　　 　　1仪器试剂与药品 　　 　　Agilent1100高效液相色谱仪(安捷伦公司)；KQ-500E型医用超声清洗器(昆山超声仪器有限公司)；TD5A低速台式离心机(长沙湘仪离心机有限公司)；电子天平(FAll04)(上海精密科学仪器有限公司)；Lichropher C18(5μm，4.6mm ID×15cm)色谱柱(淮阴汉邦科技有限公司)。甲醇为色谱纯，其余所用试剂均为分析纯；芍药苷对照品由中国药品生物制品检定所提供(批号为110736-200423)。天麻、地龙、钩藤、白芍等药材购自江苏省药材公司，经鉴定，符合《中国药典》(2005版一部)有关标准。 　　 　　2方法与结果 　　 　　2.1薄层鉴别 　　2.1.1天麻的薄层鉴别 取本品3.3mL，加70％甲醇5mL，超声处理30min，滤过，滤液作为供试品溶液。另取天麻对照药材0.5g，同法制成对照药材溶液。再取除天麻外的其它处方量药材，按制备工艺制成缺天麻的阴性样品，取适量阴性样品制成缺天麻的阴性溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2005年版一部附录ⅥB)试验，分别吸取上述3种溶液10μL，分点子同一硅胶G薄层板上，以醋酸乙酯一甲醇一水(9:1:0.2)为展开系统，取出，晾干，喷以10％磷钼酸乙醇液，在105℃加??至斑点清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，阴性对照无干扰。 　　2.1.2地龙的薄层鉴别　取本品6mL，蒸干，加氯仿20mL，水浴回流30min，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1mL溶解，作为供试品溶液。另取地龙对照药材1g，同法制成对照药材溶液。再取除地龙外其他处方量药材，按制备工艺制成缺地龙的阴性样品，取适量阴性样品，同法制成缺地龙的阴性溶液。上述3种溶液，照薄层色谱法(《中国药典》2005年版一部附录ⅥB)试验，吸取上述3种溶液10μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正已烷－乙酸乙酯(9:1)为展开系统展开，取出，晾干，置紫外灯(365nm)下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相同位置上，显相同颜色的荧光斑点。阴性对照液无干扰。 　　2.1.3钩藤的薄层鉴别　取本品40mL加氨水放置20min，加入氯仿10mL超声处理20min，重复处理3次，过滤，滤液浓缩，定容2mL。另取钩藤对照药材2g，同法制成对照药材溶液。再取除钩藤外的其它处方量药材，按制备工艺制成缺钩藤的阴J性样品，取适量阴性样品同法制成缺钩藤的阴性溶液。上述3种溶液，照《中国药典》2005版一部薄层色谱法(附录ⅥB)试验。吸取上述3种溶液15μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿一乙酸乙酯一甲醇(10:4:1)为展开系统展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。阴性对照无干扰。 　　2.2芍药苷含量测定 　　2.2.1色谱条件 色谱柱为Lichrospher C18(4.6mm×250mm，5μm)(淮阴汉邦科技有限公司)；流动相：甲醇：水(25:75)；柱温：30℃；流速：1mL/min；检测波长：230nm。理论板数按芍药苷峰计算应不低于3000。 　　2.2.2对照品溶液的制备和线性关系考察　精密称取在干燥器中用五氧化二磷减压干燥36h的芍药苷对照品适量，置于量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，使其浓度为0.384mg/mL，摇匀，作为芍药苷对照品的贮备液。分别取贮备液用甲醇稀释成0.0768、0.1536、0.2304、0.3072、0.384mg/mL芍药苷溶液，按上述色谱条件各进样10μL。测定峰面积。以芍药苷的峰面积为纵坐标，