化学计量学-光谱法研讨某些小分子与牛血清白蛋白的相互作用.pdfVIP

摘要 摘要 本论文共分为五章，主要对近年来小分子与血清白蛋白相互作用的研究概况进行了 serum 综述，并分别研究了几种小分子与牛血清白蛋白(bovine 用。光谱法在小分子与生物大分子相互作用的研究领域中的应用日益广泛，但是用光谱 法结合化学计量学方法来探讨小分子与血清白蛋白的结合机理的文章还比较少。本论文 尝试将化学计量学方法平行因子和多元曲线分辨一交替最dx--乘法用于解析实验所得的光 谱数据。讨论了方法的原理和实际应用，并探讨了化学计量学在复杂体系中实现同时解 析多组分平衡浓度和纯光谱的可行性。 第一章：本章首先简要的介绍了蛋白质的定义、结构、功能和性质等，然后依次对 小分子与血清白蛋白相互作用的研究方法、研究内容和存在的问题等方面展开了评述， 探讨了化学计量学在小分子与血清白蛋白相互作用研究中的应用。最后还展望了小分子 与血清白蛋白相互作用研究的发展趋势，将新探针的开发、各种仪器方法的联用及化学 计量学方法的引入作为研究重点。 第二章：荧光光谱法研究异丙威及2．异丙基苯酚钠与BSA的相互作用。实验发现，异 丙威与BSA通过范德华力和氢键结合形成复合物，而2一异丙基苯酚钠与BSA通过静电引力 作用结合为复合物。采用同步荧光和三维荧光光谱法探讨了异丙威及2．异丙基苯酚钠对 BSA构象的影响，结果表明异丙威及2一异丙基苯酚钠对BSA构象均有影响，甚至可能破坏 BSA的结构。通过竞争实验发现2一异丙基苯酚钠与异丙威在BSA上有相同的结合位点，并 且2．异丙基苯酚钠能将结合在BSA上的异丙威竞争出来。 BSA的相互作用，结果发现这两种药物都对BSA的内源荧光有猝灭作用，且属于静态猝 灭。热力学参数证明盐酸特拉唑嗪与BSA之间的作用力主要为氢键，盐酸哌唑嗪与BSA 之间的作用力主要为疏水作用力和静电引力。本文以华法林和安定作标记药物，采用三 维荧光技术分别对竞争实验进行扫描，用PARAFAC处理所得三维数据。根据血清白蛋 白结合位上药物的置换作用确定了盐酸特拉唑嗪和盐酸哌哗嗪的结合位点都是BSA的 siteI。 第四章：紫外吸收光谱和荧光光谱法结合多元曲线分辨一交替最小二乘法(MCR．ALS) 研究富马酸比索洛尔与BSA的相互作用。由于体系中各组分的光谱曲线有部分重叠且现 象不明显，以及MCR．ALS解析单个矩阵时存在旋转不确定性，本文采用扩展矩阵进行交 曲线很好地吻合，保证了分辨的浓度趋势图可靠。MCR-ALS很好地分辨出各组分的平衡 浓度变化趋势图，通过各图可以很直观地监测反应过程中各个组分的浓度变化，并算出 II 摘要 富马酸比索洛尔与BSA相互作用的表观结合常数。本文还通过同步荧光光谱法和紫外吸 收光谱法发现富马酸比索洛尔对BSA构象有一定影响。 第五章：荧光光谱法结合多元曲线分辨．交替最小二乘法研究伞形花内酯与BSA的 相互作用。本实验采用两种不同的试剂滴加模式对伞形花内酯与BSA的相互作用进行研 究，对经典的荧光光谱数据矩阵加以扩展，增加了实验数据的信息量；进而应用MCR— ALS对该扩展的荧光光谱矩阵进行迭代计算，较好地分辨出作用过程中的浓度变化趋势 图，并计算出伞形花内酯与BSA的表观结合常数。通过同步荧光光谱法发现伞形花内酯 对BSA的构象有一定的影响。 关键词：牛血清白蛋白；小分子；光谱法；平行因子法；多元曲线分辨一交替最小二乘法 III Abstract ABSTRACT In researchofinteractionsbetweenmoleculesandserumalbuminin thiswork．the work small recent hasbeenreviewedandtheinteractionbetweensome withbovineserum years