靶向Twist基因逆转卵巢癌耐药细胞化疗敏感性研究.docVIP

靶向Twist基因逆转卵巢癌耐药细胞化疗敏感性研究 　　作者单位：266409 山东省胶南市泊里镇中心卫生院（臧泉红）；潍坊医学院附属医院（陈昭日，张丽芹，戴淼，王春一，吕秀萍） 　　通讯作者：戴淼 　　【摘要】 目的 探讨载体表达的小干扰RNA（siRNA）影响卵巢癌耐药细胞株Twist基因的表达、促进凋亡并逆转其阿霉素耐药的可行性。方法 体外构建Twist小发卡状RNA（shRNA）的表达质粒，脂质体法介导将其转染入SKOV3/ADM细胞。采用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测Twist mRNA的表达；使用免疫细胞化学法（ICC）检测Twist蛋白的表达；使用四甲基偶氮唑蓝法（MTT）测定各组细胞对阿霉素的半数抑制浓度（IC50）；流式细胞术检测其对卵巢癌细胞凋亡的影响。结果 Twist shRNA转染组细胞Twist mRNA 的表达与其他两组相比明显减弱，Twist蛋白表达明显下调，差异均有统计学意义（P0/G1期细胞比例增多，而S期细胞比例减少，凋亡率显著升高，差异有统计学意义（P［1，2］。另外，抑制Twist表达，能增强肿瘤细胞对化疗药物的敏感性［3，4］。本研究旨在研究干扰Twist基因对卵巢癌耐药细胞SKOV3/ADM的耐药性影响，以进一步阐明卵巢癌的耐药机制，为临床提供新的治疗方案。 　　 　　1 材料和方法 　　1.1 材料 　　1.1.