香石竹查尔酮合酶基因克隆与植物反义表达载体构建.docVIP

香石竹查尔酮合酶基因克隆与植物反义表达载体构建 　　【中图分类号】R943【文献标识码】A【文章编号】1672－3783(2011)06－0002－02 　　【摘要】根据已发表的查尔酮合酶(CHS)基因的序列，设计一对引物，以香石竹品种 Master 的总cDNA为模板,扩增出香石竹查尔酮合酶基因全阅读框架序列，以Pgem-T为中间载体，序列检测的结果显示同Henkel,J.等在NCBI的基因库中发表的从香石竹品种“Clove Pink”花瓣中提取的CHS基因全开放阅读框序列一致。将序列反义克隆到双元载体PBI-121上，并导入农杆菌中 ，经PCR及酶切分析鉴定，结果表明该片段的反义序列已克隆于载体中。 　　【关键词】查尔酮合酶 植物反义表达载体 基因克隆 　　 　　花色的形成与植物体内一类次级代谢产物类黄酮有关。在花色形成中起最主要作用的是花色素。花色素在花瓣中含量的增高或降低都可能改变花的颜色[1]。查尔酮合酶(chalcone synthase,CHS)是花色素合成中的一个关键酶,它催化丙二酰辅酶A的3个乙酸基和对羟基苯丙烯酰辅酶A的一个乙酸基的缩合,产生柚配基查尔酮[2]。 　　 反义ＲＮＡ（Antisense RNA ）技术是通过人工导入反义ＲＮＡ,调控细胞内某些基因的表达,从而定向控制某些生物性状。该项技术在基因功能研究、恶性生长控制、人工免疫及植物基本功