生物医学光学第四组-活体成像技术PPT.pptVIP

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生物医学光学第四组-活体成像技术PPT

光的动量是光的一个基本属性 光不但具有能量,还具有动量。 光与物质相互作用 交换动量 在物体上的力等于光引起的单位时间内物体动量的改变,并由此引起物体的位移和速度的变化,称之为光的力学效应。 由于光辐射对物体产生的力通常称之为光的辐射压力,简称光压。 背景介绍 光遗传学技术之父: Karl Deisseroth 斯坦福大学,神经科学博士 2005年,发明了光遗传学技术。他在细菌视蛋白的帮助下用光控制了大脑细胞的开关 2010年,光遗传学被Nature Methods选为年度方法 相关原理 光遗传技术(Optogenetics),是一种将光控技术和遗传技术相结合,将光敏蛋白表达于可兴奋的靶细胞/器官上,再用相应波长激活光敏蛋白以实现对动物生理功能的调控的一项新技术 光敏蛋白 光敏特异性蛋白 光敏蛋白表 达于靶细胞 感应波长激发特异性光敏蛋白 蛋白开关启动释放电信号 刺激 动物行为 与靶细胞特异 性蛋白结合 病毒/质粒 转染 相关原理 兴奋蛋白(Activation Protein) Chr (channelrhodopsin) 是一类兴奋光敏感蛋白,其被蓝光波段光照射后可通过阳离子(Na+,K+),引起神经元的细胞膜去极化,产生动作电位。 抑制蛋白( Inhibition Protein) Hr (Halorbodopsin) 是一类抑制光敏感蛋白,其在黄光波段光的持续照射下,可将细胞外的阴离子(Cl-)不断泵入细胞内,是的神经元的细胞膜超极化。 相关原理 相关原理 光遗传学的应用 控制喜好 诱导记忆 控制行为 产生绝对焦虑 社会功能障碍 大脑深度刺激 刺激肌肉 恢复视力 抑制癫痫 总结展望 待解决问题 难以通过单次测量精确地记录一个清晰的动作电位信号 膜电位成像记录的信噪比的提高受细胞膜特异性限制 光学技术会对组织造成一定的损伤 光敏蛋白的表达会对组织产生一定的影响 ······ 以低损伤性、高空间分辨率和遗传特异性为特点的光学神经信号记录及神经功能的光控制技术的应用,在神经科学研究中已取得了一系列突破。若能在提高动作电位采集的精确性,提高膜电位成像的信噪比,降低光信号对组织的损伤有所进步,光遗传技术将对研究生物体的大脑产生极大的推动。 光学相干层析扫描技术 optical coherence tomography 邓月月 层析技术 层析:即逐层分析,通过光、声、核磁共振或电等对组织进行内部结构分析。可将层析技术分为四大类:光学层析技术、声学层析技术、电学层析技术、核磁共振层析技术。 目前应用的有X-ray层析、超声层析、核磁共振层析、光声层析。 各种层析技术的优缺点 X-ray层析:优点是对比度高,分辨率高,缺点是对一些软组织探测能力有限,并且有致癌的可能。 超声层析:具有价格低廉、设备体积相对较小,穿透深度高,但在对比度与分辨率弱于X-ray层析。 激光共焦扫描层析:优点是可以达到高对比度,但生物组织是混浊介质, 光的强散射易造成低灵敏度和低分辨率。 核磁共振层析:对软组织的探测能力高,但设备大,成本高, 价格高昂。 OCT背景介绍 OCT即光学相干断层成像技术(Optical Coherence Tomography, OCT),是继X射线、CT、MRI和超声诊断技术之后的又一新的医学断层成像方法 光学相干层析术最大优点是可以获得比X射线CT、超生成像术、核磁共振成像术等传统医学成像技术高1~2个数量级的分辨率 成像术种类 分辨率 X射线CT 300um~1mm 超声成像 500um~1mm 核磁共振成像 100um~500um OCT成像 1um~50um OCT基本原理 它将低相干测量法和光学干涉仪结合在一起 滤掉物镜焦点之外的散射光 加上现代计算机图像处理技术迅速发展成为一门新兴的层析成像诊断技术。而且 OCT 可以实现对活体组织的无辐射无损伤及实时的探测和成像。 迈克尔逊干涉仪 图1. 典型的单点光学相干断层扫描的光学设备。通过扫描照射在样品上的光束可以以微米级的分辨率以无损的方式重建样品的截面图,深度最深可达3mm。 原理图 低相干干涉测量法------提高纵向分辨率 在样品折射率确定的情况下,纵向分辨率只与光源的相干 长度有关,相干长度越短,频率越高,纵向分辨率越高 使用迈克尔逊干涉仪,将时间的测量转变成为空间的测量。OCT测量的干涉强度而非直接测量反射光的强度,但用这些信息代表反射光的强度。用光波反射时间和光波延时时间来测量距离,得到了样本深度方向(Z轴)的一维测量数据。光束穿过样品扫描,测得平行于样品表面(X-Y方向)的二维数据,将得到的三维信号经

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