第十四节 真菌及其毒素的检验PPT课件.ppt

* 第十四节 真菌及其毒素的检验 一 真菌的形态特征 真菌细胞 单细胞 单细胞呈园或椭园形，常见于酵母和类酵母菌， 多细胞 多细胞呈丝状，交织在一起成菌丝体，常见于霉菌。 1.酵母： 大多数为单细胞，卵园形，园形，园栓形或柠檬形， 大小和形态，随日龄及环境条件而异，即使在纯培养中，各个细胞的形状，大小亦有差别，在酵母菌的生长过程中形成假丝酵母。 假丝酵母:由成熟的细胞和未分化完的细胞连在一起，形成假菌丝，此种酵母称假丝酵母。 大多数酵母菌在适宜的培养基上，形成菌落与细菌相似，比细菌的菌落大，表面湿润，粘稠易挑起，有些因时间长而表面皱宿，其色多为乳白色，少数呈红色。 菌的颜色、光泽、质地、表面及边缘特征均有鉴别意义。 液体培养：有的底部产生沉淀，有的均匀生长，有的在表面生长并形成菌膜或菌醭，厚薄也因种而异，有的甚至干而皱缩，菌醭的形成及特征有分类意义。 酵母菌的繁殖 无性繁殖： 芽殖生殖：多边出芽，两端出芽，三边出芽。 芽裂：一端出芽。裂殖：横分裂，如细菌。 有性繁殖： 由两个有性细胞结合，结合在一起后两个细胞间膜破裂，两个单倍体核向一起集中，最后形成一个繁殖的细胞。 2.霉菌：霉菌均由分枝或不分枝的菌丝构成，许多菌丝交织在一起形成菌丝体，菌丝在光学显微镜下呈管状，2～10 um 比一般细菌放线菌细胞大几倍至几十倍，与酵母菌相似，而其菌丝又分为有隔菌丝和无隔菌丝，再就是根据其功能不同又分为营养菌丝，气生菌丝。 无隔菌丝：菌丝为长管状，单细胞，细胞质内含多个核，其生长过程只表现为菌丝的延长和细胞核的裂殖增多，以及细胞质的增加，如毛霉，根霉，犁头霉。 有隔菌丝：为大多数的。菌丝由横隔膜分隔成成串的多细胞，每个细胞内含有一个或多个细胞核，有些菌丝外观看起来像多细胞，但横隔膜上有小孔，使细胞质或细胞核，可自由流通，每个细胞功能也相同，如青、曲、白地霉。 霉菌的菌丝据其功能又可分为：营养菌丝，气生菌丝。 营养菌丝（基质菌丝）就是在生长过程中，伸入到培养的基质中，为真菌提供营养的菌丝。 气生菌丝图（繁殖菌丝）它主要是伸入到菌周的空气环境中，它主要作用是产生孢子，产生孢子时的气生菌丝称繁殖菌丝。 霉菌的繁殖 主要是由繁殖器官产生孢子，繁殖器管是由繁殖菌丝产生的可以是单细胞，也可是多细胞，有时产生无性孢子，有时产生有性孢子，如青霉，曲霉，在生长过程中，由于生长条件的改变，有时产生有性孢子，有时产生无性孢子，但主要还是以无性孢子为主。 有性孢子：子囊孢子，结合孢子，卵孢子，担孢子。 无性孢子：分生孢子，关节孢子，芽生孢子，孢子襄孢子，厚膜孢子。 三 真菌的培养 真菌的生长对营养的要求不高，一般马龄薯葡萄糖琼脂、沙堡弱、花生c-d，察氏，保存菌种用察氏培养基。 霉菌培养温度22～28℃，PH6.5～6.8最适宜，但它可在PH 1.7～9.3的环境中生长，一般在温度稍高，湿度较大的环境中生长。 真菌的菌落有以下三种类型： 1．酵母型菌落：类似于一般菌落，菌落光滑，湿润，柔软致密，显微镜检查可见圆形或椭圆形的生芽细胞，多见于酵母菌、隐球菌。 2．丝状菌落：菌落蔬松，呈棉絮状，绒毛状或粉末状，一部分菌丝向上空生长并形成孢子，另一部分菌丝伸入培养基下层，培养基的正面和背面可显示各种不同颜色。。 3．酵母样菌落：外观性状同酵母型菌落，但在菌落表面除见生芽细胞外，还有假菌丝伸入培养基中，念珠菌。 四 产毒霉菌的检验 1．样品的采取 （1）患病畜禽的病变组织，无菌采取脓汁、肺、肾、肝等，置培养皿中待检： （2）被毛、皮屑、或痂皮，用作皮肤致病性真菌采样时，先在病灶部涂以消毒液，然后用消毒镊子将毛连根拨出，或夹取痂皮、皮屑放入灭菌容器中待检。 （3）粮食谷物：根据粮屯、粮垛大小和类型，分层定点（一般分三层，五点）取样，或分层随机采取不同点的检样，充分混匀，取500g左右作检验用。 （4）动物饲料：包括干草等一般饲料，发酵饲料，以及发霉的谷物，分层随机取样或采霉变部分，取500g做检验 （5）动物性食品：如肉禽、乳及其制品，用灭菌工具采集可疑样品250 g 左右，装入灭菌容器中。 2．样品的处理与分离培养 (1)谷物、粮食 ①内部真菌的分离 取样品10～20克，培养前将样品在0 .1％升汞中浸泡（玉米、麦粒1～2分钟、米粒0.5分钟），然后用灭菌蒸馏水冲洗3～4遍。或直接用无菌水淘洗，加水应超过样品1～2 cm ，振荡1分钟倒去水，反复10次。后再用75％酒精浸泡1～2分钟，脱去蜡质膜，再冲洗。 用灭菌的小镊子将上述经过处理的检样，胚部向下按等距离排列接种于高渗察氏琼脂培养基平板上，接种时，必须将检样（粮粒）部分地种入培养基中，每个平板接种数量大粒约为5粒，小粒为10粒，每份检样共接种100粒，接种完毕后，置25～28℃培养一周，培养期间应注