遗传实验02：果蝇唾腺染色体luoPPT.pptVIP

遗传学实验二 果蝇唾腺染色体的制备与观察 一、实验目的 1.练习剖取果蝇三龄幼虫唾腺的方法； 2.掌握制作果蝇唾腺染色体标本的技术； 3.观察果蝇唾腺染色体的形态特征。 二、实验原理 双翅类昆虫(摇蚊、果蝇等)幼虫期的唾腺细胞很大，其中的染色体称为唾腺染色体(salivary chromosome)； 这种染色体比普通染色体大得多，宽约5μm，长约400μm，相当于普通染色体的100-150倍，因而又称为巨大染色体； 唾腺染色体经过多次复制而并不分开，大约有1000-4000根染色体丝的拷贝，所以又称多线染色体(polytene chromosome)； 三、实验材料 黑腹果蝇的三龄幼虫　 为了得到更好的染色体标本，需要在20—25℃和营养良好的条件下饲养幼虫。选择行动迟缓、肥大，爬上管壁的三龄幼虫（化蛹之前）做标本最佳。 三龄幼虫照片 四、实验仪器与试剂 １. 器具： 双筒体视解剖镜、显微镜、镊子、解剖针、载玻片、盖玻片、培养皿、吸水纸等。 ２. 试剂： 改良苯酚品红溶液、生理盐水、1N盐酸。 五、实验步骤 实验前知识准备： 果蝇三龄幼虫的唾腺位于幼虫的头部附近，可以看看显微照片中的位置 （点击图片观察放大图） 实验开始 1.唾腺剖取 把载玻片置于双筒镜下。载玻片上滴加生理盐水一滴，取三龄幼虫放在其中，操作者两手各握一枚解剖针，左手的解剖针压住幼虫后端1/3处，固定幼虫。右手的解剖针按住幼虫头部，用力向右拉，把头部从身体拉开，唾腺随之而出，唾腺是一对透明的棒状腺体 。用针剔除脂肪组织。 图示 解离： 在载玻片上除去幼虫其它部分，用吸水纸吸去生理盐水，然后在腺体上加 1滴1NHCl溶液，作用2-3min。 冲洗： 用吸水纸吸去HCl ，滴加蒸馏水于腺体上进行冲洗（两次）。 染色： 吸去蒸馏水，加1滴改良苯酚品红溶液，染色30min。 5. 压片观察：用镊子加盖玻片，压片。镜检。 六、实验结果 1.先用低倍物镜观察，找到好的染色体图像后，放到视野中心，再用高倍镜观察。 2. 黑腹果蝇染色体是2n=2×4=8（图一），但由于体细胞配对，又因短小的第4染色体和X染色体的着丝粒在端部，所以染色体的一端在染色中心上，看上去，各自只形成一条线状和点状染色体。只有第2和第3染色体的着丝粒在中央，它们从染色中心以V字形向外伸出（2L，2R，3L，3R），因此共有6条（图二）。 在显微镜下，短小的第4染色体有时不易观察到，所以最容易识别的是5条（图三）。 雄果蝇的Y染色体几乎包含在染色中心里，因为是异染色质，看起来染色可能淡?深些。有经验的人可以发现雄果蝇的X染色体比雌果蝇X染色体要细些，因为雄性只有一条X染色体。 3.唾腺染色体上的横纹宽窄、深浅是一定的，但在果蝇的特定发育时期，它们会出现不连续的膨胀，这称为疏松区（puff），目前人们认为这是这部分基因被激活的标志。 七、绘图 绘制你所观察到的清晰的果蝇唾腺染色体的图像。 八、实验分析与讨论 1、根据实验的观察可以确定果蝇的染色体数目吗？ 2、制备果蝇唾腺染色体需注意哪几个关键步骤？ 3、利用果蝇唾腺染色体可以进行哪些遗传学研究？ 九、参考文献 张贵友，普通遗传学实验指导， 北京：清华大学出版社，2003 卢龙斗、常重杰，遗传学实验技术， 合肥：中国科学技术大学出版社，1996 刘祖洞、江绍慧，遗传学实验， 北京：高等教育出版社，1987 果蝇三龄幼虫 下一张 果蝇三龄幼虫 下一张 果蝇三龄幼虫 返 回