基因组作图与基因定位PPT.pptVIP

①cosmid 是英文 cos site-carrying plasmid 的缩写, 也称粘粒、柯斯载体。是人工建造的含有λ噬菌体DNA的cos序列和质粒复制子的特殊类型的质粒载体。 ② 带有质粒的复制起点、克隆位点、选择性标记以及λ噬菌体用于包装的cos末端等。 ③可利用噬菌体体外包装的特性，利用噬菌体感染的方式将重组DNA导入受体细胞。但它不会产生子代噬菌体，而是以质粒DNA的形式存在于细胞内。 Cosmid粘粒 A T G G T C T C A C T G C A A C C G A T G G T C T C A C T G T A A C C G Met Val Ser Leu Gln Pro Met Val Ser Leu Stop YAC人工染色体重叠群1000kb cosmid人工染色体重叠群40kb亚克隆 测序和计算机分析 大片段DNA克隆： 一片段与疾病连锁 亚克隆 亚克隆 质粒亚 克隆 物理图构建和测序 ①遗传标记细分基因组：使每隔100kb就有一个标记。 ②低精度物理作图：构建覆盖每条染色体的大片段，构建数百kb的YAC，得到重叠的YAC连续克隆系。 ③高精度物理作图：将YAC随机切割后装入cosmid粘粒，在几十个kb的DNA片段水平上作图。 物理图构建 将一组不同颜色的荧光标记探针与单个变性的染色体杂交，分辨出每种杂交信号，从而测定出各探针序列的