实验一兔血清 免疫球蛋白分离与纯化PPT.pptVIP

综合实验一 兔血清免疫球蛋白分离与纯化 主讲教师：申慧芳 岳续朋 生物工程教研室 蛋白质工程实验课 实验课要求 预习 不迟到、早退、不旷课、有事请假 穿白大褂、注意自我防护 不能喧哗，不做与实验无关的事 认真完成实验报告 值日要求：擦桌子、拖地、擦黑板、倒垃圾、关灯和门窗 一、实验目的 二、实验原理 三、实验仪器及试剂 四、实验步骤 五、注意事项 六、数据处理及计算 实验一 兔血清免疫球蛋白分离 一 、实验目的 学习并掌握盐析法的原理及用盐析法进行免疫球蛋白分离与纯化的技术。（IgG ） 抗体结构 抗体分子是由两条轻链(light chain, L链)和两条重链(heavy chain, H链)通过链间二硫键连接而成。 实验原理-盐析 不同蛋白质由于所带电荷不同以及水化程度不同，加入不同浓度的中性盐可分阶段从溶液中沉淀出来。 蛋白质盐析中最常用的盐是硫酸铵 硫酸铵分级沉淀 三、 实验仪器及试剂 1. 实验材料：血清（兔免疫血清）。 2. 试剂：0.01mol/LpH7.4 PBS、0.5 mol/L NaOH、0.5mol/L HCl、饱和硫酸按（用前以5mol/ L NaOH调至pH7.4）、奈氏试剂。 三、 实验仪器及试剂 3. 用具：三角瓶、烧杯、各种吸管、