葡聚糖-胍基丁胺衍生物非病毒转基因载体经典.pdfVIP

摘 要 本文利用对甲苯磺酰基葡聚糖与胍基丁胺的亲核取代反应制备了葡聚糖-胍 基丁胺衍生物（Dex-Agm ）载体；并采用CDI 活化法先合成了月桂酸酯基-O-对 甲苯磺酰基葡聚糖，再与胍基丁胺发生亲核取代反应制备了月桂酸修饰的葡聚糖 -胍基丁胺衍生物（Dex-L-Agm ）载体。凝胶电泳、透射电镜和Zeta 电位测定结 果表明，Dex-Agm 载体可将 DNA 压缩成纳米复合物，经月桂酸改性后增强了压 缩 DNA 的能力，这可能与月桂酸疏水链段的物理吸附过程有关。对于COS-7 和 HEK293 细胞系，胍基丁胺取代度的增加和疏水链段月桂酸的引入都可使载体介 导的荧光素酶的表达量增加。通过流式细胞仪半定量分析了载体介导绿色荧光蛋 白（GFP ）在 COS-7、HEK293 和 CHOK1 细胞系中的表达，结果表明，疏水链 段月桂酸的引入可明显增加 GFP 的表达水平。通过溶血、红细胞聚集实验以及 载体和其降解产物的细胞毒性实验，考察了 Dex-Agm 和 Dex-L-Agm 载体的生物 相容性，结果显示，所构建的载体不会造成溶血和红细胞聚集，这可能是由于载 体的侧链胍基丁胺上的胍基与细胞膜组分之间存在的是双齿氢键作用，而不是会 破坏细胞膜的强静电作用。将细胞与 Dex-Agm