天然药物化学子教案第八章-香豆素.ppt

第八章 香豆素和木脂素类 能根据香豆素成分的性质进行提取和分离 能根据结构和性质的不同对香豆素进行定性鉴别 能说出木脂素的结构分类和常见的木脂素成分 能说出香豆素红外光谱、紫外光谱、核磁共振光谱的主要特征 香豆素coumarin 本 节 内 容 一、香豆素化合物紫外光谱 二、香豆素的红外光谱 香豆素红外光谱显示的最强峰为： 1750～1700cm-1内酯环的的羰基特征吸收峰； 1660～1600cm-１之间出现三个较强的芳环吸收峰； 3600～3200 cm-１的羟基特征吸收峰。 三、核磁共振谱 7-羟基取代的香豆素 C3、C6和C8质子信号在较高场； C4、C5和C7信号在较低场。 四、质谱 香豆素有强的分子峰，基峰是失去CO的苯骈呋喃离子。 木脂素lignans 本 节 内 容 实训 2．鉴定 （1）显色反应：将上述分得的七叶内酯和七叶苷各少许，分别加1ml甲醇溶解，做下列试验，观察颜色变化，纪录。 ①将上述试液各1滴，分别滴于滤纸上，于254nm的紫外灯下观察荧光，然后，在原斑点上滴加1滴10%氢氧化钠溶液，观察荧光颜色变化。 ②上述试液，分别加入7%盐酸羟胺甲醇溶液2~3滴，再加1%氢氧化钾甲醇溶液2~3滴，水浴加热数分钟，至反应完全，冷却，再用盐酸调配pH 3~4，加1%三氯化铁试液1~2滴，溶液呈红~紫红色。 实训 （2）薄层色谱鉴别 样品：自制七叶内酯和七叶苷分别用少许甲醇 溶解制成样品溶液。 对照品：七叶内酯、七叶苷的甲醇溶液。 薄层板：硅胶H-CMC-Na板 展开剂：甲苯-乙酸乙酯∶甲酸（5∶4∶1） 显色剂：在紫外光下观察，记录斑点的位置， 或用重氮化对硝基苯胺喷雾显色。 实训 项目二： 补骨脂中香豆素的提取分离与鉴定 [实训目的] 能根据溶解性采用溶剂法从补骨脂中提取香豆素成分 能熟练进行回流、连续回流、减压蒸馏、抽滤、色谱等操作 能通过分离补骨脂内酯和异补骨脂内酯， 熟悉干柱色谱法的操作技术 能正确判断薄层色谱、显色反应的结果 [实训器材] 补骨脂种子粗粉 70%乙醇 石油醚 中性氧化铝 氢氧化钠溶液 稀盐酸 7%盐酸羟胺甲醇溶液 10%氢氧化钾甲醇溶液 1%三氯化铁试液 硅胶H-CMC-Na 苯 石油醚 丙酮 回流装置、分液漏斗、常压蒸馏装置、抽滤装置、薄层色谱、干柱色谱等设备 实训 [操作原理] 补骨脂中的香豆素主要是补骨脂内酯和异补骨脂内酯，属于游离的呋喃香豆素，亲脂性较强。本试验利用补骨脂中香豆素易溶于有机溶剂，水中溶解度小的性质，用乙醇，将其从药材中提取。利用二者极性的不同，通过氧化铝干柱色谱进行分离。 [操作步骤] 补骨脂香豆素的提取:如下 实训 补骨脂种子粗粉100g 用70%乙醇回流提取3次， 每次用乙醇200ml ,40min 乙醇提取液 减压蒸馏至原体积的1/4，放置析出沉淀，抽滤 沉淀 拌入纯净的细砂，干燥，置索氏提取器中，用石油醚连续回流提取 石油醚提取液 回收石油醚至干，用10～15ml乙醇洗涤转移至50ml三角瓶中，放置，析出结晶，抽滤 黄色结晶（补骨脂总香豆素） 木脂素 溶剂法 1、溶剂提取法： 游离木脂素：是亲脂性物质，易溶于氯仿、乙醚， 木脂素苷类：可溶于甲醇、乙醇等极性较大的溶剂， 一般提取时先采用甲醇或丙酮等亲水性溶剂提取，浓缩成浸膏后，再依次用石油醚、氯仿、乙醚、醋酸乙酯等依次萃取，可得到极性不同的部位。 碱溶酸沉法 木脂素 溶剂法 2、碱溶酸沉法 具有酚羟基或内酯结构的木脂素，在碱液中 酚羟基成盐或内酯环开环成盐而溶于水，与其它脂溶性成分分离。但碱液易使木脂素异构化，从而失去或降低生理活性，故此法不宜用于有旋光活性的木脂素，以免构型改变。 碱溶酸沉法 木脂素 分离： 色谱技术是分离木脂素最有效的方法。 常用的吸附剂为硅胶和中性氧化铝， 以石油醚-醋酸乙酯、石油醚-乙醚、苯-醋酸乙酯、氯仿-甲醇等逐级增加极性洗脱，分离效果较好。 木脂素 鉴别： 1、木脂素的化学鉴别： 酚羟基：重氮化试剂、Gibb′s试剂 亚甲二氧基：Labat试剂（没食子酸硫酸试剂） Ecgrine试剂（变色酸硫酸试剂） 内酯环：异羟肟酸铁试剂 2、色谱鉴定： 硅胶薄层色谱和纸色谱。 展开剂：可用氯仿-甲醇（9∶1），氯仿-二氯甲醇（1∶1）， 显色①1%茴香醛浓硫酸试剂，110℃加热5分钟；②5%磷钼酸乙醇溶液，120℃加