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实验人类BO血型检查

实验9 人类ABO血型检查与复等位基因的遗传平衡 一、实验目的 通过实验掌握人类类ABO血型的检测方法,进一步理解和掌握基因座位(locus)和基因位点(site)的关系,复等位基因、基因共显性概念 血液的组成是:    血浆: 优良溶剂,含蛋白质、葡萄糖、无机盐、 代谢产物、 O2、CO2 血液     红细胞:含血红蛋白,容易和 O2和CO2结合    血细胞  白细胞:具免疫(淋巴细胞),吞噬机能        血小板:止血,凝血 血型:指红细胞上所含抗原的不同,应用抗原与抗体的反应,产生凝集与否,对血型进行判断: 参试人员的手指毛细管血液两滴 1.在载玻片上划分两格,分别标明A与B,如下图: 2. 用70%酒精药棉消毒手指采血部位(一般为无名指末端),再用此药棉消毒一次性采血针; 3.用采血针刺手指,挤出血液;一滴血液滴在A处,另一滴血液滴在B处; 4.在A处滴加抗A标准血清一滴,在B处加抗B标准血清一滴; 5. 分别用采血针调匀,调匀一处血液后揩擦采血针,再调另一处; 6.两分钟内肉眼观察反应结果,或用最低倍显微镜观察其凝聚的情况,反之可能产生假凝集现象。 7. 复等位基因遗传平衡的检验 本实验以人类ABO血型为例,说明平衡群体中3个复等位基因IA、IB、i基因频率的计算和平衡的检验。 设:复等位基因IA、IB、I的频率分别为p、q、r。 如果群体平衡,那么其表型、基因型及其频率满足下表 按下列公式从实际观察得到的血型(表型)平率资料中分别计算p、q、r。 i基因频率 r=√ O IB基因频率  q=1-√A+O 因为A’+O’=p2+2pr+r2=(p+r)2=(1-q)2 所以1-q=√A+O 则  q=1-√A+O IA基因频率p=1-√B+O 因为B’+O’=q2+2qr+r2=(q+r)2=(1-p)2 所以1-p=√B+O 所以 p=1-√B+O 现以实例说明某次ABO血型调查结果与hardy—weinberg平衡相适合的程度。资料来自某城市随机抽样6000个中国人的ABO血型的调查,其分布及其相关计算如下表 血型    A B AB O 总计 数目(O) 1920 1627 607 1846 6000 频率 0.320 0 0.2716 0.10116 0.30766 1 基因频率:r=√O=√0.30766 =0.55486 p=1-√B+O =1-√0.27116+0.30766 =0.2392 q=1-√A+O =1-√0.3200+0.30766 =0.20594 下面就此随机样本做χ2检验 血型    A B AB O 理论个体数 N(p2+2pr) N(q2+2qr) N(2pq) N(r2) 理论个体数(C) 1926 1638 594 1842 实际测量数 1920 1627 607 1846 6000 (O-C)2 / C 0.019 0.074 0.285 0.009 0.387 N=6000, χ2=0.387 查χ2表,这里要注意,由于计算预计的4中血型频数时,需要从实得资料中计算基因频率p、q(3个基因频率的变数中,只有任意两个是独立变数),自由度应再减去2,所以df=3-2=1, 从表中可以查到χ2df=1,p=0.05=3.841,而对应的χ2=0.387的p值大于0.05,表明此样本符合hardy—weinberg定律。 六、作业 1. 确定自己的血型 2. 表述全班ABO血型频率 3. 检验复等位基因是否平衡。 * 罗向东 江西师范大学生命科学学院 xdluolf@163.com 指导书: 实验9 (P37) 通过实

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