第四、五、六章 遗传信息传递(从DNA到DNA)DNAPPT.ppt

②细菌的遗传转化 遗传转化(genetic transformation)是指细菌品系由于吸收了外源DNA而发生遗传性状的改变现象。 感受态细胞（competent cell）： 受体细胞经过一些特殊方法（如电击、CaCl2）处理后，细胞膜的通透性发生了暂时性改变，成为能允许外源DNA分子进入的状态。 ③ 细菌的转导 转导(transduction)：是通过噬菌体将基因从供体转移到受体细胞的过程。 ④ 细菌的细胞融合 由细胞质膜融合导致的基因转移和重组。在实验室中用溶菌酶除去细菌细胞壁的肽聚糖，使其成为原生质体，可人工促进原生质体融合，由此使两菌株的DNA发生广泛的重组。 4.6 DNA的转座 转座子（transposon）：是在基因组中可以移动的一段DNA序列。一个转座子由基因组的一个位置转移到另一个位置的过程称为转座或移位(transposition)。本质是由转座子（可移位因子）介导的遗传物质重排现象。 转座子是一些较短的DNA序列，可以转移到细胞基因组的任何位置。由于它不需要序列间具有同源性，也不是位点特异性的，所以转座作用又被称为异常重组。 与DNA的同源重组相比，转座作用发生的频率要低得多。 转座作用能说明在细菌中发现的许多基因缺失或倒转现象，而且它常被用于构建新的突变体。 转座作用的特点 ①能从基因组的一个位点转移到另一个位点 （又称跳跃基因）； ②不以独立形式存在； ③转座子编码自身的转座酶； ④转座的频率很低； ⑤转座作用可引起基因表达内容的改变甚至失 活。 转座可分为复制性和非复制性两大类。 在复制性转座中，整个转座子被复制，所移动和转位的是原转座子的拷贝。 转座酶和解离酶分别作用于原始转座子和复制转座子。 损伤发生后，首先由DNA切割酶(exci-nuclease)在己损伤的核苷酸5’和3’位分别切开磷酸糖苷键，产生一个由12～13个核苷酸(原核生物)或27～29个核苷酸(人类或其他高等真核生物)的小片段，移去小片段后由DNA聚合酶Ⅰ(原核)或ε（真核)合成新的片段，并由DNA连接酶完成修复中的最后一道工序。 4.3.2.2 错配修复(mismatch repair) 错配修复可以将DNA子链中的错配几乎完全能被修复。 该系统识别母链靠Dam甲基化酶，它能使位于5’GATC序列中A的N6位甲基化。一旦复制叉通过复制起始位点，母链就会在开始DNA合成前的一小点时间（几秒钟至几分钟）内被甲基化。 此后，只要两条DNA链上碱基配对出现错误，错配修复系统就会根据“保存母链，修正子链”的原则，找出错误碱基所在的DNA链，并在对应于母链甲基化腺苷酸上游G的5位置切开子链。 4.3.2.3 直接修复(direct repair) 生物体内还存在多种DNA损伤以后直接修复(direct repair)，不需要切除碱基或核苷酸的机制。 两个例子： 1、在DNA光解酶(Photolyase)的作用下把在光下或经紫外光照射形成的环丁烷胸腺嘧啶二体及6-4光化物(6-4photoproduct)还原成为单体的过程。2、生物体内还广泛存在着使06-甲基鸟嘌呤脱甲基化的甲基转移酶，以防止形成G-T配对。 4.3.2.4 重组修复(recombination repair) 切除修复发生在下一轮DNA复制前，又称复制前修复。 肌体细胞对在复制起始时尚未修复的DNA损伤部位可以先复制再修复，这种方式称为重组修复。 这个过程发生在复制后，又称复制后修复。 复制 重组 再合成 重组修复机制的缺陷，有可能导致肿瘤发生。已经发现，妇女Brca 1和Brca 2两个基因如果有缺陷，发生乳腺癌的概率为80%。 4.3.2.5 易错修复和SOS应急反应 许多能造成DNA损伤或抑制DNA复制的过程能引起一系列复杂的诱导效应，这种效应称为应急反应(SOS response)。 SOS包括诱导DNA损伤修复、诱变效应、细胞分裂的抑制以及溶源性细菌释放噬菌体等，细胞癌变也与SOS反应有关。 SOS反应是细胞DNA受到损伤或复制系统受到抑制的紧急情况下，细胞为求生存而产生的一种应急措施。 SOS反应诱导的修复系统包括：避免差错的修复（error free repair）和易产生差错的修复（error prone repair）两类。 错配修复、直接修复、切除修复和重组修复都能够识别DNA的损伤部位或错配碱基而加以消除，在这些修复过程中不引入错误碱基，属于避免差错的修复。 由于SOS反应还能诱导产生缺乏校对功能的DNA聚合酶，所以在DNA链的损伤部位即使出现不配对碱基，复制也能继续进行，以保证细胞的存活，叫易产差错的修复。 SOS反应可诱导产生DNA聚合酶Ⅳ和Ⅴ，它们不