细胞发展PPT.ppt

Byproducts Lactate Ammonium NH4 主要由谷氨酰胺等氨基酸脱氨产生 影响细胞生长 影响细胞内氨基酸的代谢 改变胞内pH 影响蛋白糖基化过程 NH4的作用： Ammonium Alters N-Glycan Structuresof Recombinant TNFR-IgG: DegradativeVersus Biosynthetic Mechanisms lactate Lactate can change the medium pH and osmolality High-end pH-controlled delivery of glucose effectively suppresses lactate accumulation in CHO fed-batch cultures Feeding Lactate for CHO Cell Culture Processes:Impact on Culture Metabolism and Performance Contents Antibody production Metabolism of cell Cell culture medium Cell lines History of cell culture Antibody 刘金涛 E-mail:jtliu0416@ 华东理工大学海正研究院 动物细胞与组织工程研究所 Mammalian Cell Culture Contents Antibody production Metabolism of cell Cell culture medium Cell lines History of cell culture Development of Cell Culture 细胞培养 指:从生物机体取出部分组织分散成单个细胞或直接从机体取出单个细胞在体外条件下培养，细胞能继续存活与增殖，培养过程中细胞不再形成组织。 发展与完善细胞培养技术围绕以下几个方面进行： 防止污染 改进培养方法 设计新型培养容器 设计不同的培养基等。 Typical application of mammalian cell culture 1、 cell biology research 细胞生物学研究 2、toxicity testing 毒理实验 3、production of complex proteins 蛋白生产 4、production of vaccines 疫苗生产 5、tissue and organ culture 组织和器官培养 6、most frequent product： monoclonal antibodies for diagnostics and therapy 生产诊断和治疗的单抗 The Growth Type of Cell 按生长方式 贴壁依赖型细胞（anchorage-dependent cell） 悬浮型细胞（Suspension cell） 贴壁细胞 成纤维型细胞（Fibroblast-liked cells） 上皮型细胞（Epithelium-liked cells） 游走型细胞 Cell Type Contents Antibody production Metabolism of cell culture Cell culture medium Cell lines History of cell culture Normal cell 正常细胞：正常的原代培养物进行传代形成的继代培养物 增殖能力有限，最多只可传50代左右。 四个特征 无明显的基因突变 有限的寿命 细胞无恶性 贴壁依赖 贴壁依赖性细胞必须全部符合，悬浮细胞必须符合前三个 Transformed cell 培养过程中自发转化 化学转变 病毒转化 致瘤因子转化 转化细胞：正常细胞在培养过程中获得无限增殖的能力，成为连续细胞系 四种途径： 转化细胞伴随着染色体模式的改变，二倍体变成异倍体 Tumor Cell 来自于肿瘤组织的细胞或者经肿瘤组织与其他细胞融合产生的细胞 与转化细胞相比它们是恶性的，常常是非贴壁依赖性的。 Cell Line Human 293 A549 CEM-A Hela S3 Hs68 MRC-5 WI-38 324-K H9 HEL 299 HT-1080 Marmoset B95-8 Murine balb/3T3 L929 NIH/3T3 K-BAL