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19 -金属硫蛋白的提取与纯化 PAGE 1fgdgdfgdf符合法规和法规和土壤突然图腾应用荧光技术检测细胞中二硫键张璇摘要：金属硫蛋白(metallothionein，MT)是一类低分子量、富含半胱氨酸、可被金属诱导的特异性蛋白质。本文主要介绍从动物体内真核表达经过凝胶过滤、离子交换、亲和层析等方法纯化获得金属硫蛋白，并制得脱金属硫蛋白用来制备重组Zn-MT。关键词：金属硫蛋白(MT)，纯化，超滤，Zn-MT1实验方案及原理1.1 实验方案蛋白质是生命现象的物质基础之一，是生物体最重要的组成部分，要得到各种蛋白质，往往从动植物体内直接提取开始。本试验采取文献[1]记载的方法，用重金属镉诱导兔肝产生Cd-MT，有机溶剂沉淀法提取蛋白质后，过分子筛分离出金属硫蛋白，又利用离子交换的方法将MT1与MT2分开，获得两种不同的金属硫蛋白。锌离子对于地球上的生物来说是一种很重要的营养物质。这种金属元素在许多生物活动中都起着很关键的作用。在肝合成的Zn-MT被认为是体内锌的储备和转运形式，即“锌池”，可被其他组织利用。为了获得Zn-MT，本试验采用文献[2]记载的方法，用DTT进行巯基保护后在强酸的条件下使金属硫蛋白上的金属脱离，过分子筛把它们分离，获得脱金属硫蛋白。再加入过量的Z