4第四章 酶的提取与分离纯化-5节过滤与膜分离.pptVIP

酶工程 2006-2 第四章 酶的提取与分离纯化 第一节 细胞破碎 第二节 酶的提取 第三节 沉淀分离 第四节 离心分离 第五节 过滤与膜分离 第六节 层析分离 第七节 电泳分离 第八节 萃取分离 第九节 结晶 第十节 浓缩与干燥 ※ 第五节 过滤与膜分离 ◆过滤是借助于过滤介质将不同大小、不同形状的物质分离的技术过程。 ◆过滤介质常用的有滤纸、滤布、纤维、多孔陶瓷、烧结金属和各种高分子膜等。※ ◆根据过滤介质的不同, 过滤分为： 一、非膜过滤 1、粗滤 2、微滤 二、膜过滤（膜分离技术） 1、加压膜分离 2、电场膜分离 3、扩散膜分离 ※ ◆根据过滤介质截留的物质颗粒大小不同，过滤可以分为 粗滤 微滤 超滤 反渗透 等4 大类。 ※ 一、非膜过滤 ◆采用高分子膜以外的材料,如滤纸、滤布、纤维、多孔陶瓷、烧结金属等作为过滤介质的分离技术称为非膜过滤。包括粗滤和部分微滤。 1、粗滤 2、微滤 ※ 1、粗滤： ◆借助于过滤介质截留悬浮液中直径大于2μm的大颗粒，使固形物与液体分离的技术称为粗滤。通常所说的过滤就是指粗滤而言。 ◆粗滤主要用于分离酵母、霉菌、动物细胞、植物细胞、培养基残渣及其它大颗粒固形物。 ※ ◆粗滤所使用的过滤介质主要有滤纸、滤布、纤维、多孔陶瓷、烧结金属等。 ◆为了加快过滤速度，提高分离效果，经常需要添加助滤剂。常用的助滤剂有硅藻土、活性炭、纸粕等。 ※ ◆根据推动力的产生条件不同，过滤有 （1）常压过滤， （2）加压过滤， （3）减压过滤 等3种。 ※ (1)常压过滤: 以液位差为推动力的过滤。 ◆实验室常用的滤纸过滤以及生产中使用的吊篮或吊袋过滤都属于常压过滤。 ※ (2)加压过滤: 以压力泵或压缩空气产生的压力为推动力。 ◆生产中常用各式压滤机进行加压过滤。 ◆添加助滤剂、降低悬浮液粘度、适当提高温度等措施，均有利于加快过滤速度和提高分离效果。※ (3)减压过滤: 又称为真空过滤或抽滤，是通过在过滤介质的下方抽真空的方法，以增加过滤介质上下方之间的压力差，推动液体通过过滤介质，而把大颗粒截留的过滤方法 ◆实验室常用的抽滤瓶和生产中使用的各种真空抽滤机均属于此类。 ◆减压过滤需要配备有抽真空系统。由于压力差最高不超过0.1 MPa，多用于粘性不大的物料的过滤。 ※ 2、微滤: ◆微滤又称为微孔过滤。 微滤介质截留的物质颗粒直径为 0.2～2μm，主要用于细菌、灰尘等光学显微镜可以看到的物质颗粒的分离。 ◆非膜微滤一般采用微孔陶瓷、烧结金属等作为过滤介质。也可采用微滤膜为过滤介质进行膜分离。 ※ 二、膜分离技术 ◆借助于一定孔径的高分子薄膜，将不同大小、不同形状和不同特性的物质颗粒或分子进行分离的技术称为膜分离技术。 ◆膜分离所使用的薄膜主要是由丙烯腈、醋酸纤维素、赛璐玢以及尼龙等高分子聚合物制成的高分子膜。有时也可以采用动物膜等。 ※ ◆根据物质颗粒或分子通过薄膜的原理和推动力的不同，膜分离可以分为 3大类。 1、加压膜分离 2、电场膜分离 3、扩散膜分离 ※ 1、加压膜分离: 以薄膜两边的流体静压差为推动力的膜分离技术。在静压差的作用下，小于孔径的物质颗粒穿过膜孔，而大于孔径的颗粒被截留。 ◇根据所截留的物质颗粒的大小不同，加压膜分离可分为 微滤、 超滤 反渗透 等3 种。 ※ ①微滤： 以微滤膜（也可以用非膜材料）作为过滤介质的膜分离技术。 微滤膜所截留的颗粒直径为0.2～2μm 。微滤过程所使用的操作压力一般在0.1 MPa 以下。 ◇在实验室和生产中通常利用微滤技术除去细菌等微生物，达到无菌的目的。 ※ ②超滤： 超滤又称超过滤。是借助于超滤膜将不同大小的物质颗粒或分子分离的技术。超滤膜截留的颗粒直径为 20～2000 ?。相当于分子质量为 1×103～5×105 道尔顿（ Da）。 ◇主要用于分离病毒和各种生物大分子。 ◇膜的透过性一般以流率表示。 流率是指每平方厘米的膜每分钟透过的流体的量。超滤时流率一般为0.01～5.0 mL/cm2? min。膜的孔径大，流率也大。 ※ ◇影响流率的主要因素是膜孔径的大小。此外，颗粒的形状与大小，溶液浓度，操作压力，温度和搅拌等条件对超滤流率也有显著影响。 ◇在酶的超滤分离过程中，压力一