临床微生物标本采集培养流程_1课件.pptVIP

1.维系自然界的生物链和新陈代谢; 2.农业方面:根瘤菌; 3.工业方面:食品酿造,皮革,纺织,石油,化工; 4.医药卫生方面:抗生素和维生素的生产,基因工程中基因重组,污水处理无害化; 5. 人和动物体内共生微生物,条件性病原性微生物及病原性微生物. 常用培养基 痰、胸腹水：血液或体液培养法 1个血平板1个中国兰 (真菌培养1个沙保罗) 大 便：血液或体液培养法 S-S平板 脑脊液：血液或体液培养法 2个血平板 （ CO2培养缸） 培养基的选择 多种商品化的培养基 含不同改良配方的商用培养基可以提高检出率，因为没有一种单一的培养基可以检出所有的细菌 中国兰、血平皿、沙保罗 质控要求 培养条件 温度：35~37 °C 时间：研究表明临床价值的细菌95%~97%会在3~4天内检出，但仍然推荐培养5天 摇动 监测间隔 自动化血培养每10~20分钟会检测一次 当获得阳性培养结果时需进行转种 常规，或盲传阴性的血培养是不必要的 添加剂（树脂，活性炭，抗凝剂） 抗凝剂SPS最常用于血培养并显示有对革兰阳性和阴性菌增加检出率和速度的作用 其他抗凝剂如肝素，EDTA和枸橼酸钠对微生物有毒性 抗生素吸附剂有助于对已经接受抗生素治疗病人血培养的检出率 真菌 手工的方法 营养肉汤（Bottles of Nutrient broth） 双相瓶 裂解离心（Lysis centrifugation system） 全自动血培养系统 真菌：需氧培养瓶 分枝杆菌 提高检出率需要添加剂 双相瓶的检出要慢于肉汤法的全自动系统 儿童厌氧菌感染极少 ，建议只采用需氧瓶。 厌氧培养只考虑针对特殊的高危群体 皮肤消毒参照成人的方法，新生儿除外 儿童采血量不超过总血容量的1% 美国每年250,000例 死亡率：12％-35％ 危险因素：导管的种类 非隧道式的长期留置的中心静脉导管 隧道式的短期放置的中心静脉导管 外周导管 导管放置持续时间和位置 最重要的是区别是否为CRBSI？ 是皮肤污染？ 是导管本身的定植菌？ 还是导管外的其他污染源所致 急性心内膜炎：高产毒的金葡菌，立即采血，避免延迟 推荐在 经验用抗生素前30分钟之内采血培养 亚急性心内膜炎 需在30分钟至1小时之内连续抽取数套血培养，可以证明细菌感染的连续性。特别是超声心动为阴性或可疑者。 皮肤消毒尤为重要，包括换瓣膜的患者， 其主要的病原菌为皮肤定植菌如SCN。血液必须取自外周静脉而不是留置的静脉管。取自导管的血培养会伴有高污染风险、导致错误的心内膜炎诊断 正确的皮肤消毒，从不同的外周静脉采集血培养 抽取血培养的数量 最佳的血培养数量是不确定的 多套的血培养可以帮助区别血培养假阳性（如皮肤污染等） 建议：对可疑心内膜炎者，起始采集3套血培养，如果在24小时内报告为阴性，则继续采集2套血培养， 共 5套 研究表明，接受抗生素治疗后的血培养的检出率会 下降 在培养基中添加的树脂和活性炭可以吸附或中和抗生素，比标准培养瓶有效 在有树脂和活性炭的培养瓶中，污染菌也将快速生长 自动血培养系统培养5天可支持苛养菌的生长，但不能培养的微生物（如柯克斯体、立克次体等）需用分子生物学技术 乏养菌（Abiotrophia）和粒座菌(Granulicatella)：常在自动血培养系统孵育2天后出现阳性。生长需要VB6和半胱氨酸。金黄色葡萄球菌卫星试验阳性。转种巧克力平皿和厌氧琼脂，但是TSA血琼脂平皿不生长 布氏杆菌：双相培养基，CMBCS大部在3天出现阳性、 延长7天至少检出95%。 弯曲菌：空肠弯曲菌，CMBCS 2-3天，微需氧，35 °C -36 °C生长慢于42°C，至少48h可见菌落 螺菌（Leptospira）：血中不易发见。采用其他方法 螺杆菌：免疫抑制患者，3－7天阳性，转种微需氧环境和营养丰富的血平皿 军团菌：CAP常见，菌血症不常见，肾移植，瓣膜病，溶解离心系统，转种需BCYE(活性碳酵母浸液琼脂)培养基， 孵育5天。 支原体：自动化血培养不能检测，传统血培养补充明胶和精氨酸，转种支原体培养基（SP4葡萄糖琼脂，pH4.5） 血培养报告 血培养 终报告 革兰染色 传种培养 初步报告 (直接药敏) 鉴定菌株 电话报告 鉴定＋标准药敏 任何血培养的检测结果都会对患者的治疗有重要的影响 初步结果（无论是涂片或培养），只要证明为血培养阳性，就必须紧急向临床进行口头报告和沟通 紧急口头报告一定要在最短时间内完成（60分钟之内） 必须报告患者的全名、床号 与临床负责医生联系或未联系