实验二植物细胞有丝分裂的制备及观察.pptVIP

实验二植物细胞有丝分裂的制备与 观察 一、教学基本要求 1.本次实验通过对植物根尖的制片和观察, 要求学生初步掌握对植物组织细胞的固定、解离和压片方法； 2.了解有丝分裂的全过程及其染色体的动态变化情况,掌握有丝分裂各时期的特征。 二、实验原理 有丝分裂是细胞均等增殖的过程, 是体细胞分裂的主要方式。 在有丝分裂过程中，细胞内每条染色体都能复制一份,然后分配到子细胞中,因此两个子细胞与母细胞所含的染色体在数目、形态和性质均是相同的，在各种生长旺盛的植物组织中均存在着有丝分裂。 因此，选取植物体生长 旺盛的分生组织（如根尖、 茎尖、幼叶等），经固定、 解离、染色及压片等处理， 将细胞分散在装片中，显 微镜下，即可看到大量处 于有丝分裂各时期的细胞 和染色体。 三、材料和用品 洋葱、大蒜的鳞茎；或玉米、黑麦、小麦、蚕豆的种子等。本实验以大蒜为实验材料。 材料： 用具及药品： 显微镜、镊子、刀片、解剖针、载玻片、盖玻片、滤纸、培养皿、酒精灯、冰醋酸、95%乙醇、浓盐酸、改良苯酚品红等。 四、实验步骤 1、取材：选取健壮的大蒜根尖，自尖端约1cm处，将其剪下备用； 2、预处理：获得较多的中期分裂相；同时使染色体相对缩短，便于观察和计数 1）药物处理：秋水仙素、对二氯苯、8-羟基喹啉； 2）冰冻处理：将根尖浸泡于冰水之中24小时。 3、固定或前低渗处理： 1）固定处理：将根尖放入卡诺固定液中，室温固定3-24hr；如不立即使用，可转入70%的乙醇中置于冰箱或阴暗处长期保存； 2）前低渗处理：将根尖放入0.075mol/L KCl溶液中，低渗处理20min，然后，蒸馏水冲洗2-3次； 4、解离：常用的解离方法有三种。 盐酸水浴解离法； 酶解法； 浓盐酸解离法； 将根尖置于盛有1N盐酸的离心管中，并将其放入60℃水浴中，处理10-12min(关键)。 5、制片： 选（挑）取已处理过的根（茎）尖一枚，放在干净载玻片中央，除去非分生组织的部分，在生长点（非透明）处切取1毫米左右，滴一小滴上述染色液染色10分钟，盖上盖玻片，用一张大小合适的滤纸覆盖在盖玻片上，一手固定盖玻片，另一手大拇指对准材料使劲按压，使根尖细胞分散均匀。（制好的片子若不能及时进行显微镜观察，可用矾士林临时封住盖玻片四周。） 6、镜检： 将压好的片子先置于低倍镜下（10X），找到分生区细胞后，转换高倍镜(40X)观察； 分别找出前期、中期、后期、末期等不同分裂期的细胞； 间期 两次细胞分裂之间的时期, DNA复制分为三个时期：复 制前期(G1期)复制期(S期)、 复制后期(G2期)，该时期一般看不到细胞核中的染色体。 前期 染色体开始螺旋化，每个染色体由两个相同的染色单体组成，两者紧密相连(光镜下很难区别)，细胞核呈线团状。 中期 核膜解体，核仁消失，染色体排列在赤道板上，此时最有利于对染色体进行观察和计数。 后期 着丝点分裂，每两个并列的染色单体分开，有纺锤丝牵引分别移向两极。 末期 核膜、核仁重新组成，染色体解旋，形成两个新的子核，两个子核间形成细胞板，将母细胞分成两个子细胞，此时细胞分裂结束。 〖作 业〗 绘出所观察到的有丝分裂个时期图象，并注明时期及主要特征。 预处理与未预处理的分裂相有何不同为什么？