放线菌酵母菌霉菌的观察及微生物大小的测量课件.pptVIP

实验三 放线菌、酵母菌、霉菌的形态观察及微生物大小的测量 一、实验目的 1.掌握三类微生物的形态特点及所用染色法。 2.学会用测微尺测量微生物的大小。 二、实验原理 1.形态观察 （1）放线菌的形态观察 ①插片法：将菌接入平板→插盖玻片后培养→取片，观察。 ②玻璃纸法：将灭菌玻璃纸覆盖于平板→接菌→培养后观察。 ③印片法：将带有菌苔的琼脂块印在玻片上，观察。 （2）酵母菌的细胞观察及死、活细胞的鉴定 常使用美兰染色法观察和鉴定。 美兰：氧化型为蓝色，还原型为无色； 活细胞：具有较强还原能力，可还原美兰； 死细胞：无还原能力，不能还原美兰； 因此，染色后，活细胞为无色，死细胞为蓝色。 （3）霉菌的观察（根霉、曲霉、青霉） 常用乳酚油制作玻片。 ①乳酚油：具有固定、染色、保持水分、杀菌防腐作用→制成的玻片后，细胞不变形，孢子不易飞散，保存时间长。 ②根霉的观察：用乳酚油制作玻片，观察。 ③曲霉和青霉的观察：见预装片。 （4）微生物大小的测量 采用镜台、目镜两种测微尺进行测量。 ①镜台测微尺：是一块特殊的载玻片，中央刻有精确刻度（1mm分成100个小格），用于校正目镜测微尺。 ②目镜测微尺：是一圆形玻片，其上有精确刻度（50-200），经校正后用来测量。 三、实验材料 酵母菌（培养36h左右）、根霉、目镜测微尺、镜台测微尺、显微镜、接种环、接种针、盖玻片等。 四、实验步骤 1.观察放线菌、青霉和曲霉的预装片（示范） 2.酵母菌玻片的制作 在干净载玻片上加一滴美兰染液→→无菌操作，取少量菌种与染液混匀→→盖上盖玻片，吸去多余染液，静置3min，观察（形态、出芽及死、活细胞），绘图。 3.根霉压片的制作 在干净载玻片上加一滴乳酚油→→用接种针挑取少量带孢子的菌种置于染液中→→盖上盖玻片，备用观察（孢子囊、假根及匍匐枝），绘图。 注：可用解剖镜观察根霉自然生长状态。 4.微生物大小的测量（以酵母菌为例） （1）校正目镜测微尺 ①取出目镜，将透镜旋下，将目镜测微尺刻度朝下放在目镜镜筒内的隔板上后，旋上透镜插入目镜筒内。 ②将镜台测微尺有刻度的一面朝上，放在载物台上。先用低倍镜观察，调节使目镜测微尺与镜台测微尺的刻度平行，找出两尺的两条刻度线完全重合的区域。 ③记录两重合区间目镜与镜台测微尺分别占的格数 ④换成高倍镜。用同样方法进行校正，并记录数据。 （2）菌体大小测量 移去镜台测微尺，放上酵母菌玻片，用目镜测微尺测量10个菌体的长宽并记录。 （3）注： 取酵母菌时，接种环务必冷却，防止烫死酵母菌。 每人一套测微尺，小心使用，损坏赔偿。 五、作业 1.绘制酵母和根霉的形态图，并标注特殊结构。 2.记录测量酵母菌大小的结果。填写表1、表2。 * * 螺旋型孢子丝 直型孢子丝 霉菌的静孢子左：毛霉的孢子囊；中：孢子囊壁破裂，露出静孢子；右：囊轴 青霉的扫帚状分生孢子 镜台测微尺 目镜测微尺 目镜测微尺每小格长度（μm） 两重合线间镜台测微尺格数×10 两重合线间目镜测微尺格数 16×10 16×40 校正示意： 40 高倍镜 10 低倍镜 目镜测微尺每格代表的长度(μm) 镜台测微尺格数 目镜测微尺格数 物镜倍数 物镜 表1 目镜测微尺校正结果 *