分子诊断与临床PPT课件.ppt

超过1/1000，有些1%—10%。如高血压、冠心病、动脉粥样硬化、哮喘、高脂蛋白血症、糖尿病、胃及十二指肠溃疡、精神分裂症、风湿病、癫痫、甲亢、唇裂、腭裂等。 研究方法 关联研究(association study) 连锁分析(linkage analysis) 基因组筛查 (genomic scanning) 候选基因研究(candidate gene study) 肿瘤的发生是内因（机体）和外因（环境）相互作用的结果，基因水平的异常是关键因素。 肿瘤具有遗传性，遗传的物质基础是基因 肿瘤是一类分子病、基因性疾病 T(9;12):费氏染色体,CML T(14;18):B系淋巴瘤 T(11;12) 易感基因检测：如流感 利用易感基因进行健康预测的问题 单基因疾病：检测相关基因或染色体畸变做健康预测，或产前诊断可信的 易 感 基 因 ：只能作有限的参考 原因： 易感基因的研究和检测技术正处发展过程中 并非所有疾病都可以预测 现阶段发现的部分疾病的易感基因还难以直接应用于临床治疗和预防 3、肿瘤分子诊断的问题与对策 癌基因的激活、抑癌基因的失活（或缺失） 原癌基因 细胞癌基因 病毒癌基因 生长因子及受体、蛋白激酶、转录因子等 肿瘤抑制基因 肿瘤转移相关基因 肿瘤耐药基因 等 癌基因或抑癌基因在正常细胞的基因组中 存在 表达/不表达状态 表达程度 肿瘤标志的特异性 易感基因的关联性 肿瘤分子诊断的问题与对策 4、分子诊断中的伦理问题 医学论理学的一般原则： 有利、无害、公正、尊重 遗传服务：一种面向社会的应用遗传技术的医学实践 需遵守医学伦理学 实施依赖于分子诊断技术 内 容：遗传咨询、遗传检查、遗传筛查、 基因治疗、辅助生殖等 主要途径：基因检查、染色体检查 个人遗传信息的不当使用 遗传歧视 5、分子诊断中的质量问题和标准化 分子诊断实验室的质量管理 一般实验室的质量管理 特殊性的质量管理 高技术性 高严谨性 高污染性 分子诊断实验的标准化 五、分子诊断的发展方向 DNA DNA及其表达产物（mRNA和蛋白） 单一技术 多项技术的有机组合 定性诊断 半定量和定量诊断 治疗性诊断 疾病的预防、预测性分析 诊断技术由常规方法 生物芯片和蛋白质组学 范围由单基因疾病、感染性疾病 多基因疾病 应用范围由疾病的诊断、治疗 生命科学、环境学等领域 1。对送检的材料进行检测分析 2。感染性疾病：采用核酸检测（1/一般性检出策略，即明确所感染的病原体；2/完整检出策略，病原体定性后，需进行分型和耐药性检测。） 遗传性疾病：单基因/多基因（1/直接诊断策略（致病基因的DNA序列分析，即直接检测导致遗传性疾病发生的各种遗传缺陷）；间接诊断策略（除了致病基因的DNA序列分析外的 其他诊断方确定致病基因后，在家系内确认其存在遗传病风险评估，开展产前检查） 肿瘤发生：肿瘤为一种基因性疾病，可采取策略：1/检测肿瘤相关基因（直接诊断）；2/检测肿瘤相关病毒的基因；3/检测肿瘤标志物（间接诊断）。 3。人类致病原因：内因（遗传因素为主），外因（环境因素）。进行基因诊断时，可采用5种基本方法（染色体分析，DNA含量测定，基因突变的检测，基因联锁分析，基因表达状态的检测） 4。人类疾病的发生是由遗传基础与环境因素相关，故需从功能和结构层次认识到不同个体的环境相关疾病的易感性与遗传背景的差异，寻找相关易感基因。 5。细菌的耐药性和肿瘤的耐药性。2基本策略：1/通过耐药基因表达改变来分析其耐药性；2/通过检测病原体的亚型或突变点从而分析其耐药性。 ASO：等位基因特异性寡核苷酸探针杂交 RFLP：限制性片段长度多态性分析 SSCP：单链构象多态性分析 DGGE：变性梯度凝胶电泳 DHPLC：变性高效液相色谱 FISH：荧光原位杂交 CGH：比较基因组杂交，可弥补FISH不足，可粗略探测整个基因组结构上扩增或缺失的变化，常用于肿瘤研究。 ISH：原位杂交 IHC：免疫组织（细胞）化学染色 基因芯片技术：可进行已知基因的测序或突变分析、基因型鉴定、基因多态性分析、基因组内的区域扩增或缺失分析，以及mRNA转录物的表达模式分析。最主要应用将在遗传病、肿瘤及感染性疾病的分子诊断方面，可用于研究遗传性突变、肿瘤组织、炎性器官以及病原体的检测。提高检出率：Β地贫：存在上百个突变，但目前诊断仅限于几个最普遍的已知突变的