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尿液分析的标准化及其尿沉渣定量检测技术新进展ppt课件.ppt

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尿液分析的标准化及其尿沉渣定量检测技术新进展 尿液分析的发展回顾 1590年荷兰人詹森发明了世界上第一台复合显微镜 1673年,Frederick Dekkers用加热醋酸酸化尿液的方法检测蛋白 1896年,Daiber出版了他的尿沉渣图谱 1911年,Benedict提出了稳定方便的尿糖检测方法 Johns Hopkins Hospital 的Charles Emerson发表名著《临床诊断》 1956年Alfred Free发明的CLINISTIX?,尿液分析史上第一个“浸入即读”的测试方法 国内尿液分析方法回顾 50~60 手工化学分析 70~80 手工化学分析 尿沉渣镜检 80~90 尿液干化学分析 2K~2K1 尿液干化学分析 尿沉渣镜检 2K2 完整的尿液分析= 干化学+尿流式+镜检确认 检验医学的发展对尿液分析的要求 更准 为临床提供更为准确可靠的检验结果 更快 缓解检验科不断增加的样品量的压力 为临床提供更为及时的检验报告 更多 为临床提供更多的实验室诊断指标 目前尿液分析所存在的问题 更准? 过分依赖尿液干化学分析 尿沉渣镜检的方法学不精密性 样品处理过程所带来的干扰 人工镜检主观因素的影响 更快? 单个样品:9.75分钟* 批量处理:5.25分钟* 更多? *尿液分析最佳方法,Frank Bailey,ASCP 尿液干化学检测方法的局限性 例如: 白细胞:肾移植病人淋巴尿不表现脂酶 尿糖:受其它还原物质的影响造成假阴性 细菌:只能检测革兰氏阴性杆菌 …… 定性结果,不能用于疗效的监测 结论:不能代替镜检 尿沉渣分析的重要性 红细胞:泌尿系出血、泌尿系恶变、出血性疾病 白细胞:泌尿系感染、急性肾小球肾炎、肾移植排异 上皮细胞:肾小管病变 管型 红细胞管型:急性肾小球肾炎、肾梗塞 白细胞管型:急性肾小球肾炎、肾综合症、肾盂肾炎 上皮细胞管型:肾小管病变,如肾脏疾病、多种中毒 透明管型:肾小球毛细管损害 颗粒管型:肾盂肾炎、慢性肾疾病 细菌:泌尿道感染 显微镜检查的不精密度 UF-100、CD-3500、计数板三种方法对比 检测104份脑脊液 在低白细胞数的检测中, UF-100的CV为4.9% CD-3500的CV为28% 镜检法的CV为40% 显微镜检查的影响因素 标本在分析前形态改变 标本混合不当 离心的尿量不同 离心速度和时间不同 尿沉渣重悬的液量不同 尿沉渣重悬的方法不同 镜检一滴沉渣的液量不同 盖片或计数板的差异 视野数目和位置的差异 成份识别上的人员差异 显微镜视野大小的差异 尿沉渣检查标准化的建议 标本的收集及运送 2.2 标本的运送 按上述要求留取尿液应在2小时内完成检验。 尿沉渣检验的操作步骤 3.2 镜检 计数细胞数或管型,按××/μl报告。 材料与器械 1.5 自动化设备 有条件的实验室也可使用各类自动、半自动的尿沉渣分析仪作为尿沉渣分析,或用作过筛,但此类仪器必须经权威机构认可。 各种改良的镜检系统 国联在线UD-S自动染色工作站 普利生AMP2000自动扫描式尿沉渣工作站 DiaSys R/S2000系统 主要部件为一个玻璃的光学计数板 计数板固定在显微镜上并连接一个加样泵 尿液标本首先按照常规步骤进行处理 将加样管插入离心管的底部,启动加样泵吸取180微升的沉渣并利用涡流混合重悬 在加样泵作用下尿沉渣流入检测区,分布在光学计数板上 计数后,系统自动用700微升的盐水冲洗管路和计数板以防止交叉污染 目前尿液分析所存在的问题 更准? 过分依赖尿液干化学分析 尿沉渣镜检的方法学不精密性 样品处理过程所带来的干扰 人工镜检主观因素的影响 更快? 单个样品:9.75分钟* 批量处理:5.25分钟* 更多? *尿液分析最佳方法,Frank Bailey,ASCP 为什么要使用全自动尿沉渣分析仪? 全自动尿沉渣分析仪UF-100/UF-50 全自动尿沉渣分析仪 结果准确、重复性好 特异的荧光染色技术 9-氮杂菲(Phenanthridine) 染色DNA和RNA 发射荧光为: 橙色 对死细胞胞膜穿透性强 羰花青(Carbocyanine) 细胞膜、核膜以及线粒体等膜性物质被染色 发射荧光为:绿色 彩色打印报告-临床报告 质量控制 临床应用 血尿来源的鉴别诊断 红细胞信息 UF-100对血尿来源的判断 Toru Hyodo, Kazuo Kumano et al. Detection of glomerular and non-glomerular red blood cell by automated urinary sediment analyzer. Jpn J Nephrol 37:35-43,1995.

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