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指南免疫比浊法检测免疫球蛋白课件
免疫比浊法检测免疫球蛋白; 实验原理;免疫比浊法分类; 透射比浊法和散射比浊法光路;(一)基本原理
是个极其简单的方法。在抗原过量情况下,与待测样品中相应的Ig发生抗原-抗体反应,形成可溶性复合物,使反应介质的浊度发生改变。
测量方法利用分光光度计测量被吸收的量。读数以吸收单位(A)或OD值表示,A值反映了入射光和透射光的比率。待测物中Ig含量可通过标准曲线计算得出。
待测样品中的抗原含量与吸光度呈正比,而与透射光呈反比。
反应在PEG的作用下,加速复合物的形成。;透射比浊法测定原理;样品;透射比浊法的缺陷:; 原理;散射比浊法测定原理;散射光测定; 速率散射比浊法
(一)基本原理
;CONCENTRATION;方法评价:
敏感度高
快速(不必达平衡)
抗原抗体结合的动态测定,理论上测定不受本底散射信号的影响
可检测微量样品; 原理;散射比浊法的缺陷;影响免疫比浊测定的因素;1、透射比浊操作简便,适用于普通的自动生化分析仪和普通的分光光度计,几乎所有的实验室均能开展。不足的是灵敏度和精密度均不够理想,所需的抗血清量大,检测的周期较长。
2、散射比浊的优点是灵敏度、精密度均较高,检测快速。其缺点是需特定的分析仪器,试剂价格高。;免疫浊度法测定中应注意的问题1、伪浊度的影响?????????? 伪浊度形成原因很复杂,主要是抗血清含有非特异性的交叉反应性杂抗体成分;增浊剂浓度和反应时间掌握不当;样品本身的浊度处理不当;试剂的污染和变质;器材尤其是比色杯等不够清洁等因素。2、非特异性散射光的影响????? 免疫浊度法经常受内源性光散射的干扰,为避免这些非特异性光散射的影响,应用透射比浊法时需保证抗体组分在3%以下,散射比浊法需保证在 0.5%以下。??
;本实验中应用聚乙二醇的生理特性
聚乙二醇是中性、无毒且具有独特理化性质和良好的生物相溶性的高分子聚合物,聚乙二醇即PEG具有高度的亲水性,在水溶液中有较大的水动力学体积,并且没有免疫原性。当藕联到药物分子或药物表面时,可以将其优良性质赋予修饰后的??物分子,改变它们在水溶液中的生物分配行为和溶解性,在其修饰的药物周围产生空间屏障,减少药物的酶解,避免在肾脏的代谢中很快消除,并使药物能被免疫系统的细胞识别。; 材料; 结果计算方法;Thank you !
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