细胞生物学习题讲解1高中生物竞赛辅导课件.pptVIP

细胞生物学习题1 第15题 调节溶液的pH值，使氨基酸的氨基和羧基的解离度相等，即氨基酸的电荷为O，氨基酸在电场中不移动，此时溶液的pH值为氨基酸的等电点，用pI表示。 在等电点时，氨基酸溶解度最小，容易沉淀。 18题 27 透析（dialysis）： 通过小分子经过半透膜扩散到水（或缓冲液）的原理，将小分子与生物大分子分开的一种分离纯化技术。 Km定义:当反应速度达到最大反应速度一半时，底物的浓度(其单位为浓度单位)。 Km是酶的特征物理常数 ——用Km的不同可以鉴别不同的酶 ——Km只与酶性质有关，与酶的浓度无关 Km可以表示该酶与底物的亲和力 ——Km大表示该酶与底物的亲和力小 ——Km小表示该酶与底物的亲和力大 天然底物： 35 * 两性解离和等电点 阴 极 阳 极 pH=pI pHpI pHpI 带正电荷 带负电荷 净电荷为零 导电率 溶解度 渗透压 粘度 达到最低 等电点时蛋白质的特殊性质 原因:在等电点时，蛋白质分子以双极离子存在，总净电荷为零,颗粒无电荷间的排斥作用,易凝集成大颗粒，因而最不稳定，溶解度最小，易沉淀析出。 电泳分离 沉淀分离 …… pH=pI 溶解度最小 等电点沉淀与分离 大部或全部沉淀下来 pHpI或 pHpI 仍留在溶液中 蛋白质的分离 沉淀出来的蛋白质可保持天然构象，能再溶解于水并具有生物活性。 等电聚焦电泳 加 酸 加 碱 pI 小 大 pH 高 低 关键是形成pH梯度 影响酶催化反应的因素 （1）酶浓度的影响 （2）底物浓度的影响 E + S ES P + E 3.4.3.2 米氏方程式 1913年德国化学家Michaelis和Menten推导了米氏方程 Km — 米氏常数 Vmax — 最大反应速度 3.4.3.3 米氏常数的意义和测定 1, Km的意义 *