分光光度_1.pptVIP

仪器 722N型分光光度计 分析化学实验 邻二氮菲吸光光度法测定铁 邻二氮菲吸光光度法测定铁 一、实验目的 二、实验原理 三、试剂及仪器 四、实验步骤 五、注意事项 六、数据处理 一、实验目的 掌握吸光光度法中确定最大吸收波长的方法。 掌握采用分光光度计进行定量分析的实验技术。 了解分光光度计（722N 型）的构造和使用方法。 实验原理 朗伯—比耳定律： Cu2+、Co2+、Ni2+、Cd2+、Hg2+、Mn2+、Zn2+等离子也能与phen生成稳定配合物，在少量情况下，不影响Fe2+的测定，量大时可用EDTA掩蔽或预先分离。 二、实验原理 在pH2～9的溶液中，Fe2+与邻二氮菲(phen)生成稳定的橘红色配合物Fe(phen)32+ pH=5显色，?max＝508nm，?＝1.1×104L?mol-1?cm-1 实验原理 光度计的主要部件： 光源 单色器 检测系统 吸收池 、 显示装置 光源 单色器 比色皿 光电元件 显示装置 三、试剂及仪器 试剂： 10?g·mL-1铁标准溶液 0.15％邻二氮菲 10％盐酸羟胺溶液 1mol?L-1HAc－NaAc 未知浓度铁试液 仪器 容量瓶 吸量管 容量瓶 移液管 722N分光光度计的使用 722N型分光光度计是较为常用的一种数字显示分光光度计。 它以碘钨灯为光源，光栅为色散元件。可用波长范围是330~800nm，波长精度2nm，吸光度显示范围为0~1.999，试样架可置四个吸收池。 开机 安装好仪器后，检查样池位置，使其处在光路中（拉动拉手应感应到每档的定位），关好样品室门，打开仪器电源开关，预热10分钟，即可进行测量。 打开样品室门，将方式定于透光率档，按0%T进行机械调零。 比色皿 从蒸馏水中取出比色皿，擦干。注意拿比色皿的时候拿毛玻璃面。 向比色皿中注入溶液 向比色皿内注入少量试液，润洗三次，然后注入3/4至4/5的试液，用滤纸片擦干外壁所挂水珠。 将比色皿按顺序放入样品池。注意光面对光源。 吸光度测量 在样品池中放置空白液与样品。 按需要调节波长旋钮，使显示窗显示所需波长。 使空白溶液位于光路中，按方式选择键使透光率指示灯亮，按100%T键调100%，至窗口显示100%。 吸光度测量 打开样品室门，观察显示是否为0.0，否则按0%T键调零。 重复上两步，直至仪器稳定。 将样品置入光路，放到吸光度档，从显示屏上读取吸光度。 四、实验步骤 标准系列溶液及未知溶液的配制： 在7个50mL容量瓶中，用吸量管分别加入0.0，2.0，4.0，6.0，8.0，10.0mL10 ?g·mL-1铁标准溶液,10.0mL铁试液，再分别加入1mL盐酸羟胺，2mLphen溶液，5mLHAc-NaAc缓冲溶液，每加入一种试剂后都要摇匀。然后，用水稀释至刻度，摇匀，放置10min 。 实验步骤 吸收曲线的制作和测量波长的选择： 取标准系列中4号瓶溶液（即6.0mL铁标液），用1cm比色皿，以试剂空白（即0.0mL铁标液）为参比溶液，在440～560nm之间，每隔2～10nm测一次吸光度。 以波长?为横坐标，吸光度A为纵坐标，绘制A与?关系的吸收曲线。选择测定Fe的最大吸收波长。 1 4 实验步骤 标准曲线的制作： 用1cm比色皿，以试剂空白为参比，在所选择的波长下，依次测量各标准系列溶液的吸光度。 以含铁量为横坐标，吸光度A为纵坐标，绘制标准曲线。 1 2 3 4 5 6 实验步骤 试液中铁含量的测定： 同样条件下测量未知试液吸光度。 从标准曲线上查出并换算原试液中铁的含量(?g·mL-1) 。 1 7 五、注意事项 每加入一种试剂均需将溶液摇匀； 注意勿将标准试剂玷污； 标准系列的次序不能搞混； 改变波长后，光度计应重新调100%； 仪器开盖预热。 六、数据处理 测量波长的选择： ?/nm 440 450 460 470 480 490 495 500 502 504 A ?/nm 506 508 510 512 514 520 530 540 550 560 A 数据处理 吸收光谱图的绘制： 最大吸收波长 ?/nm A 0 ?max 数据处理 标准系列及未知液的测定： 编号 2 3 4 5 6 7 A 数据处理 标准曲线的绘制及试液中铁含量的测定： A mg?mL-1 0 Ax cx 下次实验 过氧化氢含量的测定