医学肿瘤药理学课件.ppt

2.8 举例 一份完整的实验报告中要包括样品名称、批号、来源、给药方案、实验设计人、试验操作人、报告审核人、所用的瘤株及试验日期。 报告实验内容包括：实验开始与结束时的动物数量，动物体重，肿瘤重量（生存时间）等。 * 举例——某些样品对小鼠肝癌Hep S生长抑制作用筛选试验的结果 * 样品名称 (组别) 动物数（只） 动物体重（g，X±S） 肿瘤重量 （g，X±S） 抑瘤率 （%） P值 试验开始 试验结束 试验开始 试验结束 生理盐水 样品A 样品B 样品C 样品D 14 10 10 10 10 12 10 10 8 10 21.08±1.00 21.20±1.14 21.09±1.00 21.09±0.94 21.16±0.95 27.95±3.68 25.15±2.31 27.52±2.22 17.94±1.68 26.24±3.26 2.76±0.69 0.55±0.38 2.03±0.37 0.23±0.17 2.45±0.46 — 80.07 26.45 91.67 11.23 — ＜0.001 ＜0.01 ＜0.001 ＞0.05 样品名称： 批号： 来源： 给药方案（剂量、途径、次数）： 实验设计： 试验操作： 报告审核 试验日期： 年 月 日至 年 月 日 2.9 人体肿瘤裸鼠异种移植动物模型 （1）原理 裸鼠又称无胸腺小鼠，具有以下4个特点：①先天性胸腺缺如；②胸腺依赖性免疫功能缺乏，其T细胞功能接近于零，但B细胞功能大致接近正常；③人体肿瘤异种移植时无排斥反应，故可供人体肿瘤移植。且肿瘤移植后保持其原有的功能，组织形态，免疫学特点以及染色体组型和对抗肿瘤药物原有的敏感性。④裸鼠因皮肤裸露，操作方便，易于动态观察肿瘤的生长。 （2）方法 可以选择已经建株的人的肿瘤细胞，也可以选择新鲜的肿瘤组织，为了方便起见，以选用前者为最多见，移植材料可以来自生长于裸鼠的肿瘤瘤块，也可以来自经过培养肿瘤细胞悬液，前者按照瘤块接种法接种，后者用细胞悬液接种法接种。待肿瘤明显生长（大约超过100mg）后分组给药。 * 2.9人体肿瘤裸鼠异种移植动物模型 （3）评价 与小鼠实体肿瘤评价方法相同，以肿瘤生长抑制率表示。 （4）注意事项 使用人体肿瘤异种移植模型应该注意以下事项：①目前认为人体裸鼠异种移植模型对抗肿瘤药物的反应与临床上的治疗反应基本平行，对临床疗效有较好的预告价值；②裸鼠饲养环境要求严格，繁殖比较困难，试验成本昂贵；③裸鼠对药物毒性的敏感性与普通小鼠相似。 * 3 样品抗肿瘤活性的确证（二）——体外筛选实验 抗肿瘤药物的体外筛选试验（细胞试验）是一种重要的药物筛选手段。它具有快速、灵敏、所需样品节省、实验成本低等特点。如果样品可以和肿瘤细胞直接接触而发挥作用其实验结果与临床的治疗效果会有较好的符合性。 抗肿瘤药物的筛选研究中细胞试验的内容非常丰富的，已经培育了大量的的肿瘤细胞株，。这一特点也取决于肿瘤细胞本身所固有的生物学特性——肿瘤细胞的“不死性”。 * 3.1 原理与基本操作要点 3.1.1实验原理 采用组织培养技术，可以在体外条件下建立具有不死性的、可以无限传代的肿瘤细胞系。应用这些肿瘤细胞株进行抗肿瘤药物的筛选实验及作用机制的探讨，发现新的活性物质，是药物研究的重要手段。肿瘤细胞试验技术操作的主要内容就是细胞的培养技术，它们包括细胞的培养、传代和保存。 * 3.1 原理与基本操作要点 3.1.2基本操作要点 （1）肿瘤细胞的培养 ①严格无菌操作，污染是细胞培养失败的首要原因。必要时可以使用抗菌素，常用的抗菌素是青霉素与链霉素。 ②适宜的温度。一般均为37℃。 ③适宜的酸碱度。应将pH控制在7.0 ～ 7.4的中性范围内。 ④提供细胞生长所需的营养条件。以合成培养基和小牛血清（或胎牛血清）按照一定比例混合后使用。不同的肿瘤细胞所需的培养基可能是不同的。 * 不同肿瘤细胞对培养基的要求举例 * 代号 组织类型 所需培养基 MEL HL-60 K562 MCF-7 A549 小鼠红白血病 人早幼粒性白血病 人慢粒性白血病 人乳腺癌 人非小细胞肺癌 Hams F12，也可用MEM、1640 1640 1640 MEM或1640 Dulbecco MEM 3.1 原理与基本